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- 2018-06-23 发布于浙江
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第十章_基因工程菌发酵
第十章 基因工程菌的发酵 基因工程是指在基因水平上,采用与工程设计十分类似的方法,根据人们的意愿,主要是在体外进行基因切割、拼接和重新组合,再转入生物体内,产生出人们所期望的产物,或创造出具有新的遗传特征的生物类型,并能使之稳定地遗传给后代。 基因工程的核心技术是DNA的重组技术。 除DNA重组技术外,基因工程还应包括基因的表达技术,基因的突变技术,基因的导入技术等。 基因工程一般分为4个步骤: 取得符合人们要求的DNA片段,这种DNA片段被称为“目的基因”; 将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组DNA; 把重组DNA引人某种细胞; 把目的基因能表达的受体细胞挑选出来。 工程菌的获得 确定目的产物,找出产该产物的细胞。 将细胞破碎后提纯出全部信使RNA。这些信使中包含了该细胞内表达的所有蛋白质的合成信息。 利用基因扩增技术(PCR),找出所需的目的基因。 将目的基因连接到设计好的质粒载体,形成了重组DNA分子。 将重组后DNA分子引入到受体细胞内,然后选择合适的培养条件使细胞繁殖。根据选择性标记,从菌落中筛选出目的基因的重组(工程)菌。 工程菌具备的条件 发酵产品是高浓度、高转化率和高产率的,同时是分泌型菌株。 菌株能利用常用的碳源,并可进行连续发酵。 菌株不是致病株,也不产内毒素。 代谢控制容易进行。 能进行适当的DNA重组,并且稳定,重组的DNA不易
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