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细胞工程第十章植物种质资源的离体保存

谢谢大家! 主要内容: 第一节 植物种质资源的常温限制生长保存 第二节 植物种质资源的低温保存 第三节 植物种质资源的超低温保存 学习的目标与要求: 了解植物种质离体保存的类型与特点,及其基本操作技术。了解植物人工种子的概念与发展概况、特点与制备方法。 具备利用植物组织培养技术进行种质资源保存的认知,具有人工种子制备基础能力。 植物种质资源的离体保存 种质资源的重要作用 1、种质资源或称基因库是选育新品种的最基本的原始材料。 2、有人说:“人类的命运将取决于人类理解和发觉植物种3、资源的能力。” 3、选育新品种时利用的材料单位是性状,如颜色、高矮、早熟性和抗病性等。 4、选育新品种需要原始材料——已有的栽培品种、半栽培类型和有关野生植物。只要其具有一些能结合到栽培品种上的有用性状,就都可以作为原始材料。 植物种质资源的离体保存 种质(germplasm)是亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。 植物种质资源(plant germplasm resources)即为携带各种不同遗传物质的植物总称,又称遗传资源或品种资源,包括栽培,野生及人工创造的各种植物的品种或品系。 种质资源保存(germplasm conservation)是指在天然或人工创造的适宜环境条件下,贮存植物种质,使其保持生命力与遗传性的技术。 植物种质资源的离体保存 种质资源的保存方式有两种,即原生境保存和非原生境保存。 原生境保存:将植物的遗传材料保存在它们的自然环境中。原生境保存的地方多是植物保护区,另一种方法为农田种植保存。 非原生境保存: 将植物的遗传材料保存在不是它们的自然生境的地方。 非原生境保存方式有植物园、种质圃、 种子(质)库、试管苗库、超低温库等。具体保存方法有四种:种植保存、贮藏保存、离体保存和基因文库保存。 种质资源的离体保存(germplasm conservation in vitro):是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体等材料,采用限制、延缓或停止其生长的处理措施使之保存,在需要时可重新恢复其生长,并再生植株的方法。 离体保存的意义 1、使一些无性繁殖作物种质资源低温长期保存,避免资源的丢失。 2、节省土地和劳力,方法简单,花费少并能在保存中脱毒。 3、一旦利用可快速繁殖;也利于种质交换。 离体保存的方法: 常温限制生长 低温保存 超低温保存 一、植物种质资源的常温限制生长保存 1.常温限制生长保存的概念 正常条件下由于材料生长很快,需经常继代,增加了工作量及费用,不适合种质资源保存。 通过提高渗透压、添加生长延缓剂或抑制剂 、干燥、降低气压、改变光照条件等,限制培养物的生长,使转移继代的间隔时间延长达到保存种质的方法。 2、常温保存的方法和原理 (1)高渗保存法 利用培养基的高渗透压,减少离体培养物吸收养分和水分的量,减缓生理代谢过程,从而减缓生长速度,达到抑制离体培养材料生长的种质保存方法。 高渗物质:甘露醇、蔗糖、PEG等, 高渗保存配合低温效果更明显,如:6~10℃低温下,培养基中加4%甘露醇,可保存马铃薯1 ~ 2年,存活率最高可达90%以上。 (2)生长抑制剂保存法 在培养基中加入生长抑制剂以减缓培养材料的生长,达到长期保存种质材料的保存方法。 生长延缓剂: ABA、青鲜素、CCC、多效唑、B9等 ,使试管苗生长缓慢,生长健壮、叶色浓绿、移栽成活率高。 (3)抑制生长的其他保存法 低压保存法:降低培养材料周围气压,达到抑制生长的目的,分为低气压与低氧压两种,保存原理相似。 饥饿法:从培养基中减去1~2种营养元素,使植株缺乏相关营养而处于最小生长量 干燥保存法:减少培养材料的含水量 矿物油覆盖法:使培养材料与空气隔绝,延缓生长 低光照培养:适当减弱光照强度,缩短光照时间,进而减缓试管苗生长 二、植物种质资源的低温保存 1、低温保存的概念 用离体培养的方式在非冻结程度的低温下(一般为1-9℃)保存种质的方法。 方法简单,存活率高 2、低温保存的方法和原理 低温使植物生长速度就会受到抑制而减慢,老化程度延缓,因而延长了继代的时间间隔而达到保存种质的目的 三、植物种质资源的超低温保存 1、种质资源超低温保存的发展概况 20世纪70年,Nag和Street首先证明胡萝卜悬浮培养细胞在液氮中保存后能恢复生长。 植物超低温种质保存(cryopreservat

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