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无籽西瓜组培快繁技术研究 　　摘要：以无籽西瓜“牧童”的种子为材料，以其子叶为外植体，研究了其再生植株的适宜培养条件。结果表明：MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA是子叶诱导的最适宜培养基。不定芽在添加0.3 mg/L NAA 的1/2MS培养基上生根效果最好。 　　关键词：无籽西瓜；子叶；组织培养 　　中图分类号：S651.04+3文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）07-0012-03 　　无籽西瓜（Citrullus lantus）与普通二倍体西瓜相比，糖度高、食用方便、耐贮运，备受广大消费者青睐[1，2]。但无籽西瓜在栽培过程中，却存在“两低一慢”（发芽率低、成苗率低、前期生长慢）问题，而利用组织培养技术快速扩繁成为解决这一难题的有效途径。目前国内外许多学者利用无籽西瓜不同外植体均已成功获得再生植株；高新一等[3]利用顶芽获得了再生植株，Andrus等[4]以无籽西瓜下胚轴作为外植体，诱导出再生苗；张娜等[5]以子叶为外植体，建立了无籽西瓜“蜜童”的再生体系。但由于所选用的品种和外植体不同，得出的最适培养基也各不相同。本研究以潍坊市种植面积较大的无籽西瓜“牧童”子叶为外植体，系统研究了再生植株的适宜培养条件，旨在建立一种高效再生繁殖体系。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　选用市场上销售的无籽西瓜“牧童”的种子为试材。 　　1.2试验方法 　　1.2.1无菌幼苗的培养将无籽西瓜牧童的干种子剥去种皮，将种胚分别装进灭菌纱布袋中，在清水中浸泡2 h后，放入灭菌烧杯中，用体积分数70%的乙醇消毒30 s，再用1 g/L升汞消毒10 min，无菌水冲洗3～5次，然后分别将无菌种胚播种到MS培养基上，于室温（25℃）、黑暗条件下培养2～3 d，待种胚露芽后，转移到25℃、光照16 h/d、光强2 000～2 500 lx的条件下，培养获得无菌苗。 　　1.2.2不同浓度6-BA诱导分化不定芽试验在超净工作台上将培养6～8 d的无菌苗子叶剪下，切成0.5 mm2长方块。分别接种于添加0（CK）、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/L 6-BA的MS培养基上，每处理接种15个外植体，重复3次。35 d后观察并统计不同浓度6-BA诱导分化不定芽情况。 　　1.2.36-BA与 NAA不同浓度配比诱导分化不定芽试验将筛选出适宜浓度的6-BA分别与0，0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/L NAA配比，添加到MS培养基上，每处理接种15个外植体，重复3次。35 d后观察统计6-BA和NAA诱导不定芽情况。 　　1.2.4不同浓度NAA诱导不定根试验将生长至2.5 cm左右高的不定芽自基部切下，转接到分别含有0（CK）、0.1、0.3、0.5 mg/L NAA的1/2MS生根培养基上诱导生根，21 d后观察统计不定根诱导情况，比较不同浓度NAA对生根率和根系长势的影响。 　　1.2.5诱导不定芽和不定根的培养条件及数据统计分析不定芽和不定根的诱导分别以MS和1/2MS为基本培养基，添加蔗糖30 g/L 、琼脂8 g/L，pH值调至5.8。不定芽和不定根在（24±1）℃、光照14～16 h/d、光强2 000～2 500 lx的条件下诱导培养，35 d后统计诱导不定芽的分化结果； 21 d后统计不定根的诱导结果。 　　芽诱导率（%）=出芽外植体数/接种外植体数×100； 　　分化系数=出芽总数/出芽外植体数； 　　生根率（%）=生根不定芽数/接种不定芽数×100。 　　试验数据采用Duncan’s新复极差法进行比较。 　　2结果与分析 　　2.1不同浓度6-BA对诱导分化不定芽的影响 　　由表1可以看出，添加不同浓度6-BA的5个处理均比对照显著地提高了不定芽再生频率和分化系数；随着6-BA浓度的增加，芽再生频率和分化系数先提高后降低，当6-BA浓度超过3.0 mg/L时，不定芽诱导受到抑制，芽再生频率和分化系数显著降低。综合比较认为，在MS培养基中添加2.0 mg/L 6-BA的处理诱导不定芽效果较好，芽再生频率为84.44%，芽分化系数为7.74。 　　2.26-BA与 NAA不同浓度配比对诱导分化不定芽的影响 　　由表2可以看出，在添加2.0 mg/L 6-BA与不同浓度的NAA的5个处理中，芽再生频率和分化系数随NAA浓度的升高而下降，当NAA浓度超过0.2mg/L时，不定芽诱导受到较强抑制，褐化率和死亡率增加。仅添加2.0 mg/L 6-BA 的处理虽然芽再生频率和分化系数较高，但不定芽生长较弱，出现玻璃化。添加2.0 mg/L 6-BA 与0.1 mg/L NAA的处理诱导不定芽效果最好，芽再生频率高达88.89%，芽分化