真核生基因表达调控.ppt

真核生物基因表达调控 THE CONTROL OF EUKARYOTIC GENE EXPRESSION 第一节 概述 一.真核生物基因表达调控的特点: 在真核生物中,染色体的结构对基因的表达有明显的调控作用; 在原核基因表达调控中,正调控和负调控同等重要;在真核基因表达调控中,正调控占主要地位; 真核基因的转录和翻译是在不同地点不同时间进行,从而使真核基因的表达有多种转录后的调控机制; 真核生物基因表达存在细胞特异性或组织特异性。 二.真核基因表达调控以正调控为主 真核基因组较大,出现调节蛋白在DNA上的非特异性结合的问题;解决办法是使用多个调控蛋白,而用多种蛋白质调控一个基因的表达,必须都是正调控; 真核基因组所含的基因数目多,但分化了的细胞中,每种细胞只需表达一小套基因: 如用负调控,细胞合成阻遏蛋白的负担太大。 采用正调控,由于每种细胞的大部分基因是不表达的,细胞只需要合成它需要的一小套激活蛋白就可以了。 第二节 DNA水平的调控 基因丢失: 在细胞分化过程中,某些原生动物、线虫、昆虫等体细胞通过丢失某些基因而除去这些基因的活性。 马蛔虫:只有一对染色体,染色体上有许多着丝点。 发育早期:只有一个着丝点行使功能,保证了正常有丝分裂的进行; 一定阶段:将来分化产生体细胞的细胞中染色体断裂,形成许多小染色体。 含着丝点的小染色体:以后的细胞分裂中都保持下去; 不含着丝点的小染色体:因不能在细胞中正常分配而丢失。 将来行成生殖细胞的细胞中,不存在染色体断裂现象。 四膜虫: 大核: 营养核 可转录 小核: 生殖核 无转录活性 大核由小核发育而来,发育过程中有多处染色质断裂,并删除约10﹪的基因组DNA。被删除序列的存在可能抑制了基因的正常表达。 高等生物中,基本上没有类似的基因丢失现象-全能性 特例:红细胞 基因扩增 通过改变基因数量来调节基因表达产物的水平 非洲爪蟾卵母细胞: 为储备大量核糖体以供卵细胞受精后发育的需要,通常都要专一性地增加编码核糖体rRNA的基因(rDNA) rDNA的滚环复制: 拷贝数由1500→2×106,总量可达细胞DNA的75﹪,当胚胎期开始后,所合成的rDNA失去需要而逐渐降解消失。 活泼转录区染色质的结构变化: 染色质的两种状态: 非活性状态【inactive (silent) state 】:如异染色质 活化状态【active state 】: 活泼转录区对核酸酶的敏感性提高 正在转录的DNA甲基化程度降低; 活泼转录的染色质常常缺乏组蛋白H1,其他核心组蛋白则被乙酰化或与泛素相结合而修饰 非常活泼的转录区,如许多真核生物的rRNA基因处,没有核小体结构 两种状态的相对稳定性: 如果在启动子处形成核小体,转录因子和RNA聚合酶就不能结合 如果转录因子结合和RNA聚合酶结合于启动子区域,形成稳定的起始复合物,组蛋白就被排斥在外 基因表达与否,是转录因子还是组蛋白首先与控制位点相结合,是一个很重要的因素 一旦形成相对稳定的结构,不会再由于转录因子和组蛋白游离成分浓度平衡的变化而改变 染色质重建(Chromatin remodeling ) 指在基因转录活化时,依赖于能量供给的核小体组蛋白置换和重排过程。包括: 组蛋白八聚体在DNA上滑动,改变特定序列在核小体表面的位置 组蛋白八聚体之间的间距发生改变 组蛋白八聚体和DNA分离,产生无核小体的游离DNA间隙 染色质重建(Chromatin remodeling ) 染色质重建需要重建复合体的参与 Remodeling complex 重建复合体的中心是它的ATP酶亚基 组蛋白的修饰: 组蛋白N端尾部,尤其是H3和H4的修饰,起始了染色质结构的变化 甲基化、乙酰化和磷酸化 通常认为乙酰化和活性染色质,甲基化和非活性染色质相关,但这并非是一个统一的规律 乙酰化: 乙酰化是可逆的,分别由相应的酶来催化 乙酰化:组蛋白乙酰转移酶(HAT) 去乙酰化:组蛋白去乙酰化酶(HDAC) 转录激活因子和HAT活性相关联,转录阻遏物则和HDAC活性相关联 转录激活因子和HAT活性相关联: 具有HAT活性的辅助转录因子p300/CPB和PCAF, 连接转录激活因子和基本转录装置 p300/CPB乙酰化H4的N端尾部,能和激素受体、AP-1等转录激活因子相互作用 PCAF优先乙酰化H3 甲基化: 组蛋白H3 9Lys的甲基化是染色质浓缩区域的一个重要特征 反应由组蛋白甲基转移酶催化 大多数DNA甲基化的位点是CpG岛,在异染色质中CpG序列通常是甲基化的,而启动子区域CpG岛的非甲基化是基因表达所必需的 DNA的甲基化和组蛋白的甲