对地红霉素肠溶片释放度测定方法分析.docVIP

对地红霉素肠溶片释放度测定方法分析 　　【摘 要】目的 对地红霉素肠溶片释放度测定的三种方法进行系统的研究和比较，并建立其最佳测定方法。方法 分别采用口占 吨氢醇显色法、硫酸显色法以及高效液相色谱法测定地红霉素肠溶片的释放度，对每种方法进行方法学的研究和验证。结果 采用三种方法均可以准确地测定地红霉素肠溶片的释放度，不同方法测得结果差异较小。结论 硫酸显色法因试剂易得，操作简便，快捷、准确，将其作为最佳测定方法。 　　【关键词】地红霉素；测定方法 　　地红霉素（dirithromycin）是一种新的第二代红霉素类大环内酯类抗生素，由红霉环胺与脂肪醛酸缩合而成。地红霉素通过阻碍细菌转肽过程，抑制细菌蛋白质的合成。体外试验证明地红霉素对临床上多种常见致病菌有抗菌作用。地红霉素具有与红霉素相似的抗菌谱，其特点是药动学性质优良，半衰期长达20～50h，不良反应相对较轻。 　　1.仪器与试药 　　1.1仪器 　　ZRS-8型智能溶出试验仪（天津大学无线电厂）；ShimadzuUV-2401PC型紫外-可见分光光度计；Shi-madzu高效液相色谱仪（LC-10ATvp泵、SPD-10Avp可见紫外检测器、SCL-10Avp控制器）；AE200电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。 　　1.2试药 　　地红霉素对照品（纯度99.83%）为自制，并由中国药品生物制品检定所标定；地红霉素肠溶片（规格：0.25g）为自制产品；10%口占吨氢醇甲醇溶液购自北京恒业中远化工有限公司；乙腈、甲醇为色谱纯；盐酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氢氧化钠及硫酸等均为分析纯。 　　2.方法与结果 　　2.1口占吨氢醇显色法 　　在采用口占吨氢醇显色法测定本品释放度的过程中发现，完全依照USP23中的显色条件，方法的线性和耐受性不佳；经过改良显色条件，可使方法具有较好的线性和显色稳定性。其他条件如对照品溶液的浓度、检测波长等则与USP23中条件相同。 　　2.1.1美国药典中的显色条件 　　精密量取待测溶液0.50ml，加入0.50ml乙酐，混匀。然后加入5.0ml冰乙酸，静置5min，加入0.50ml口占吨氢醇试液，放置30min使显色。 　　2.1.2改良后显色条件 　　精密量取待测溶液1.0ml，加入0.10mol/L盐酸溶液4.0ml，摇匀，再加口占吨氢醇试液10.0ml，混匀，于沸水中加热5min，于冰浴中冷却，再于室温放置15min。 　　口占吨氢醇试液的配制取10%口占吨氢醇甲醇溶液0.02ml，置100ml量瓶中，加冰乙酸20ml及盐酸1ml，摇匀，用冰乙酸稀释至刻度。 　　2.1.3标准曲线的制备 　　精密称取地红霉素对照品适量，用pH6.8磷酸盐缓冲液溶解并分别稀释成0.07、0.14、0.21、0.28、0.35、0.42、0.49和0.56mg/ml的标准溶液。分别精密量取1.0ml，按上述方法进行显色，测定540nm波长处吸收度。以吸收度A对标准溶液浓度C（mg/ml）进行回归，得标准曲线方程为：A=1.8452C-0.0042，r=0.9998。 　　2.1.4溶液室温放置稳定性试验 　　取上述0.28mg/ml的标准溶液于室温下放置，分别于0、1、2、4、6和8h精密量取1.0ml进行显色，测定。结果表明溶液的吸收度在4h内变化不大。 　　2.1.5回收率试验 　　精密称取地红霉素11、14及17mg，分别置50ml量瓶中，加入处方量的空白辅料，用pH6.8磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤。分别精密量取续滤液1.0ml，按上述方法进行显色，于540nm波长处分别测定吸收度。计算测得量及回收率。 　　2.1.6测定法 　　取本品，先以盐酸溶液（9→1000）900ml为溶剂，采用篮法，转速100r/min，经2h，每片肠溶膜均不得有裂缝或软化现象；继以磷酸盐缓冲液（pH6.8）900ml为溶剂，45min时取溶液10ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另精密称取地红霉素对照品适量，用pH6.8磷酸盐缓冲液溶解，并稀释成0.28mg/ml的溶液，作为对照品溶液；精密量取上述溶液各1.0ml，加入0.10mol/L盐酸溶液4.0ml，摇匀，再加入 口 占 吨氢醇试液10.0ml，混匀，于沸水中加热5min，于冰浴中冷却，再于室温放置15min。以空白试剂溶液作对照，于540nm波长处测定吸收度，以两者的比值计算释放百分率。 　　2.2硫酸显色方法 　　采用显色条件与地红霉素肠溶片试行标准中规定的相同条件，即以（75→100）硫酸液5ml为显色试剂，室温下反应1h，检测波长为482nm。 　　2.2.1标准曲线的制备 　　精密称取地红霉素对照品适量，用pH6.8磷酸盐缓冲液