第9章-第1节-分子荧光与磷光.pptVIP

第九章 其他仪器方法 一、光致发光原理 二、光致发光与分子结构关系 relation between fluorescence and molecular structure 三、荧光强度的影响因素及测定步骤 四 荧光光谱仪 五 应用 一、光致发光基本原理 luminescence process of molecular fluorescence phosphorescence 2.电子激发态的多重度 辐射能量传递过程 二、激发光谱与荧光(磷光)光谱 excitation spectrum and fluore-scence spectrum 2.荧光光谱(或磷光光谱)【发射光谱】 3.激发光谱与发射光谱的关系 镜像规则的解释 2.定量依据与方法 9.1.2荧光的产生与分子结构的关系 relation between fluorescence and molecular structure 2.化合物的结构与荧光 四、影响荧光强度的因素 relation between fluorescence and molecular structure 9.1.4荧光光谱仪 可获得三维光谱图的仪器 9.1.5 荧光分析方法与应用 3.荧光分析法的应用 磷光分析法的应用 * * * * 第一节 分子荧光与磷光 molecular fluorescence and phosphorescence 由分子结构理论，主要讨论荧光及磷光的产生机理。 1. 分子能级与跃迁 分子能级比原子能级复杂； 在每个电子能级上，都存在振动、转动能级； 基态(S0)→激发态(S1、S2、激发态振动能级)：吸收特定频率的辐射；量子化；跃迁一次到位； 激发态→基态：多种途径和方式(见能级图)；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势； 第一、第二、…电子激发单重态 S1 、S2… ； 第一、第二、…电子激发三重态 T1 、 T2 … ； S0→T1 禁阻跃迁； 通过其他途径进入 (见能级图)；进入的几率小； S2 S1 S0 T1 吸 收 发 射 荧 光 发 射 磷 光 系间跨越 内转换 振动弛豫 能 量 l 2 l 1 l 3 外转换 l ?2 T2 内转换 振动弛豫 荧光发射：电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态（ 多为 S1→ S0跃迁），发射波长为 ? ‘2的荧光； 10-7～10 -9 s 。 由图可见，发射荧光的能量比分子吸收的能量小，波长长； ? ‘2 ? 2 ? 1 ； 磷光发射：电子由第一激发三重态的最低振动能级→基态（ T1 → S0跃迁）； 电子由S0进入T1的可能过程：（ S0 → T1禁阻跃迁） S0 →激发→振动弛豫→内转移→系间跨越→振动弛豫→ T1 发光速度很慢： 10-4～100 s 。 光照停止后，可持续一段时间。 荧光(磷光)：光致发光，照射光波长如何选择？ 1.荧光(磷光)的激发光谱曲线 固定测量波长(选最大发射波长),化合物发射的荧光(磷光)强度与照射光波长的关系曲线 （图中曲线I ） 。 激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子最多，荧光强度最大； 固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射的荧光(或磷光强度)与发射光波长关系曲线(图中曲线II或III)。 a.Stokes位移 激发光谱与发射光谱之间的波长差值。发射光谱的波长比激发光谱的长，振动弛豫消耗了能量。 b.发射光谱的形状与激发波长无关 电子跃迁到不同激发态能级，吸收不同波长的能量(如能级图? 2 ,? 1)，产生不同吸收带，但均回到第一激发单重态的最低振动能级再跃迁回到基态，产生波长一定的荧光(如? ‘2 )。 c. 镜像规则 通常荧光发射光谱与它的吸收光谱（与激发光谱形状一样）成镜像对称关系。 基态上的各振动能级分布与第一激发态上的各振动能级分布类似； 基态上的零振动能级与第一激发态的二振动能级之间的跃迁几率最大，相反跃迁也然。 (1)定量依据 荧光强度 If正比于吸光度A、荧光量子效率?和激发光强度I0， If = KA? I0， A=? l c 浓度很低时： If = 2.3 ? I0 ? l c = Kc 1.分子产生荧光必须具备的条件 （1）具有合适的结构； （2）具有一定的荧光量子产率。 荧光量子产率