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两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型比较 　　[摘要] 目的 为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌（Hp）抗体及其分型试剂的敏感性和特异性，从而判断其在临床诊断中的应用价值。方法 临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）检测幽门螺杆菌抗体及其分型（分为CagA、VacA和Urease），共检测血清476份，检测结果与对比试剂不同的标本用第三方经SFDA认证的试剂进行复核，对于Urease不符合的病例，采用北京康美天鸿生物科技有限公司的幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）进行检测，对于CagA和VacA不一致的标本，则采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒进行检测。结果 南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌抗体及其分型试剂CagA阳性符合率94.5%，阴性符合率96.5%，总符合率95.8%（P0.05）；Urease阳性符合率95.1%，阴性符合率92.7%，总符合率95.4%（P0.05）；VacA阳性符合率91.6%，阴性符合率97.1%，总符合率95.2%（P0.05）；两种方法结果经统计学检验差异无统计学意义。结论 经以上结果的分析，本次临床试验的有效病例476例，大渊Hp分型检测试剂盒（蛋白芯片法）与伯劳特幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）的一致率均在90%以上，产品质量达到临床使用要求。 　　[关键词]幽门螺杆菌抗体；分型；蛋白芯片法；免疫印迹法 　　[中图分类号] R446 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）09-122-03 　　幽门螺旋杆菌（helicobacter pylori，Hp）是一种革兰氏阴性杆菌，是能够在人的胃中生存的唯一微生物种类。幽门螺旋杆菌外形为S形或弧形弯曲，细菌可以穿过胃黏膜而定居至胃上皮细胞，又能产生大量尿素酶，分解尿素在菌体周围形成一股碱性的“氨云”，可以抵抗胃中的酸性环境，免受胃酸杀死。 　　1 材料与方法 　　1.1 研究对象 　　随机选取2013年1月～2013年2月本院门诊及住院患者476例。男256例，女220例；年龄1～79岁。平均年龄33.8岁。包括慢性乙型肝炎患者136例，健康体检者108例，其他疾病患者146例（包括妊娠，结核，伤寒，甲状腺功能低下，脂肪肝，高血压等）以及胃炎胃溃疡患者86例. 　　1.2 方法 　　分别用大渊生产的幽门螺旋杆菌分型检测试剂盒（蛋白芯片法）与经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）对以上476例血清进行检测，并严格按照各自操作说明书的要求进行操作。对于Urease不符合的病例，采用北京康美天鸿生物科技有限公司的幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）进行检测，对于CagA和VacA不一致的标本，则采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒进行检测。 　　2 结果 　　2.1 两种试剂盒检测结果比较 　　南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的幽门螺旋杆菌（Hp）分型检测试剂盒（蛋白芯片法）与深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）相比较，所做临床试验有效病例共476例，两者结果对比如下。 　　2.2 不符样本的复检 　　经以上结果的分析，本次临床试验的有效病例476例，大渊Hp分型检测试剂盒（蛋白芯片法）与伯劳特幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）的一致率在90%以上。CagA指标出现的不符合病例、Urease指标出现的不符合病例、VacA指标出现的不符合病例分析见表2。 　　由表2可见，南京大渊生物技术工程有限责任公司所生产的幽门螺旋杆菌（Hp）分型检测试剂盒（蛋白芯片法）与深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）进行比较，总体来看二者检验结果的一致率已达到要求，产品质量达到临床使用要求。 　　3 讨论 　　近20多年的研究发现，幽门螺旋杆菌感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构（WHO/IARC）将幽门螺旋杆菌定为Ⅰ类致癌原[1]。据文献[2-3]报道，CagA蛋白是Ⅰ型HP致病性的标志物，CagA蛋白能够破坏顶端连接，降解基膜，干扰上皮细胞分化，使上皮细胞失去极性及细胞黏附性，伸出迁移伪足具有侵袭性，从而导致广泛的组织炎症，促使溃疡病的发生发展[4-5]。HP穿透黏液层在胃上皮细胞表面定居，对胃上皮细胞和胃粘膜屏障等造成破坏作用，刺激上皮细胞增殖，改变增殖与凋亡的关系[6-7]。VacA可使上皮细胞空泡样变性