基于主成分分析不同初加工方法大黄蒽醌及酚酸类成分比较研究.docVIP

基于主成分分析不同初加工方法大黄蒽醌及酚酸类成分比较研究 　　[摘要] 该实验目的是对10种不同初加工方法的大黄药材中的蒽醌类及酚酸类成分进行比较研究，探索大黄产地加工方法对成分的影响。利用HPLC同时测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、没食子酸、儿茶素7个主要成分含量，利用紫外分光光度法测定了总酚酸含量。采用SPSS软件进行了主成分分析，利用主成分得分进行大黄评分评级。不同的初加工方法大黄药材总蒽醌类成分含量变化呈现一定的规律性，大黄采收后是否趁鲜切制以及如何干燥，直接影响其有效成分蒽醌及酚酸的含量。结果表明奉节产大黄烘干大块干货评分最高，支根总蒽醌和酚酸均比主根含量高，水润过程产生提高蒽醌类物质含量及降低酚酸类物质含量作用。 　　[关键词] 大黄；主成分分析；初加工；蒽醌；酚酸；HPLC；含量测定 　　[收稿日期] 2013-10-16 　　[基金项目] 重庆高等职业技术院校应用技术推广中心新技术推广项目 　　[通信作者] *高文远，Tel：（022E-mail：pharmgao@ 　　[作者简介] 付绍智，E-mail：fushaozhi@ 　　大黄享有我国传统中药“四大金刚”之一的美誉，是我国四大最常用的中药之一。重庆三峡地区奉节及毗邻的湖北利川是大黄的传统道地产区，植物来源为药用大黄Rheum officinale Bail.，商品上习称“马蹄大黄”。 大黄的传统加工方法主要有熏干法、烘干、阴干[2]等，其产地加工无技术指南，存在一定的盲目性和随意性。2010年版《中国药典》一部大黄项下也只是简单阐述大黄采挖后如何加工，没有其产地加工品及质量的相关记载。大黄采收后是否趁鲜切制以及如何干燥，直接影响其主要药效成分蒽醌类及酚酸物质的含量[3-4]。游离蒽醌类成分为大黄的主要药效成分之一[5]，本文以蒽醌类和酚酸类成分含量为评价标准，利用HPLC直接测定不同初加工方法对大黄中5种蒽醌类和2种酚酸成分含量的影响，探讨了蒽醌类和酚酸类成分在大黄初加工过程中的变化规律，为大黄药材质量标准的制订及其产地初加工技术改进提供依据。 　　1 材料 　　Waters 1525-2998高效液相色谱系统，安捷伦HP1100色谱仪，G1311A四元泵，HPRev.A.0501化学工作站；CP225D型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；KH-250B型超声清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）；WND-200型高速中药粉碎机（浙江省兰溪市伟能达电器有限公司）。 　　大黄素购自中国食品药品检定研究院（批号110756-200100）；芦荟大黄素（纯度98%），大黄酸（纯度98%），大黄酚（纯度98%），大黄素甲醚（纯度98%），儿茶素（纯度98%），没食子酸（纯度98%）均购自金测分析技术有限公司（天津）；浓盐酸，磷酸，三氯甲烷，无水碳酸钠均购自天津江天化工有限公司；福林酚试剂购自天津市光复科技发展有限公司；纯净水购自娃哈哈集团公司；色谱纯甲醇购于康科德科技有限公司。 　　大黄药材采自重庆奉节云雾乡及毗邻的湖北利川元堡镇，原植物及药材经天津大学高文远教授鉴定为药用大黄Rh.officinale Bail.，共10批，初加工方法见表1。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 Kromasil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），5种蒽醌类物质以甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）为流动相；检测波长254 nm。儿茶素和没食子酸的流动相为乙腈（A）-0.5%冰醋酸（B），0～5 min，2% A；25 min，8%A；45 min，12%A；50 min，80%A；55 min，2%A。 检测波长280 nm，理论板数按大黄素峰计算应不低于3 000。色谱图见图1，2。 　　表1 不同大黄样品的产地及加工方法 　　Table 1 Producing areas and initial processing method of different processed products from Rheum officinale 　　注：批号相同代表同一株大黄，批号不同代表不同株。 　　1. 芦荟大黄素；2. 大黄酸；3. 大黄素；4. 大黄酚；5. 大黄素甲醚。 　　图1 大黄对照品（A）及样品（B）的蒽醌成分HPLC图 　　Fig.1 HPLC chromatograms of anthraquinones constituents of the standard mixture solution （A） and samples （B） 　　1. 没食子酸；2. 儿茶素。 　　图2 大黄对照品（A）及样品（B）酚酸成分的HPLC图 　　Fig.