BP1在乳腺癌组织中临床表达及其与Bcl―2表达相关性.docVIP

BP1在乳腺癌组织中临床表达及其与Bcl―2表达相关性 　　[摘要] 目的 探讨BP1在乳腺癌组织中的临床表达及其与Bcl-2表达的相关性。 方法 资料随机选自2012年5月～2013年5月在本院行手术治疗的乳腺癌患者72例的乳腺癌组织标本作研究组，资料选择同一患者癌旁组织标本72例作对照组，对两组予以Westem blot和免疫组织的化学法行阳性检测，分析两组BP1蛋白的阳性表达，研究组BP1与Bcr-2表达相关性，以及BP1和乳腺癌病理因素相关性。 结果 研究组BP1阳性表达，比对照组BP1阳性表达高，比较差异具统计学上的意义（P 　　[关键词] BP1；乳腺癌；Bcl-2 　　[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）23-24-03 　　乳腺癌属于临床女性最普遍恶性肿瘤，目前国际上病死率仅比肺癌低，位于致死疾病第二位，且仍然处于逐年增长的趋势。乳腺癌的致病标志物研究一直属于临床研究重要课题，以期能为乳腺癌的治疗找到新方向。本研究主要对2012年5月～2013年5月在本院行手术治疗的乳腺癌患者72例的乳腺癌组织标本中BP1蛋白的阳性表达及其与Bcl-2表达的相关性进行研究，报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　本资料随机选取2012年5月～2013年5月在本院行手术治疗的乳腺癌患者72例，年龄为31～76岁，平均（46.0±6.7）岁。 　　1.2 诊断标准 　　患者的临床症状均与相关标准中乳腺癌的诊断标准相符合，且经过钼钯及彩超等相关检查方法的确诊[1]。 　　1.3 纳入和排除标准 　　纳入标准：患者均知情并同意相关病理检验；所有患者无手术和麻醉相关禁忌证。排除标准：手术前经过化疗、放疗者；无严重的心脏肝肾疾病者。 　　1.4 方法 　　将在本院进行手术治疗的乳腺癌患者72例的乳腺癌组织标本作研究组，将同一乳腺癌患者的乳腺癌旁组织（距离乳腺癌的病灶边缘大于5cm位置处正常的乳腺组织）标本72例作对照组，对两组予以Westem blot和免疫组织的化学方法进行阳性检测。 　　1.4.1 试剂和材料选择 实验中材料和试剂选择，BP1蛋白由Novus Bio-logicals生产的兔抗BP1的多克隆抗体，由Santa Cruz生产的Bcl-2的鼠抗单克隆的抗体，β-actin的鼠抗单克隆的抗体等。选择由Sigma Biotechnology生产的硝酸纤维的过滤??；Promega生产的NBT/BCIP的显影剂，以及北京的中杉金桥生产的免疫组化和DAB的显示相关试剂盒等。 　　1.4.2 Westem blot方法 将从机体取下并做好的组织均放与-80℃的温度下保存，从研究组和对照组两种细胞均取下组织100mg放在EP管内，剪碎后放入匀浆液冰水中高速匀浆直到组织块不可见，然后进行离心，提取上层清夜。依据改良后的Lowary等方法，进行蛋白测定以及两组标本中BP1的阳性表达和其与Bcl-2表达相关性的测定。 　　1.4.3 免疫组化方法 选择研究组乳腺癌的组织标本，连续切片后，进行切片的脱蜡至水，后微波修复，选择免疫组化的试剂盒进行封闭，放置于温度4℃下进行过夜等操作，通过DAN的显色之后，选择苏木精进行复染，乙醇的脱水以及中性树胶的封片等操作，检测BP1的阳性表达和其与Bcl-2的表达相关性等。 　　1.5 观察指标 　　观察并统计分析两组组织标本中的BP1的临床表达，研究组乳腺癌的组织中BP1及Bcr-2的的临床表达，以及乳腺癌的组织中BP1和临床病理相关性情况。 　　1.6 疗效标准 　　1.6.1 阳性表达相关标准 BP1阳性表达主要分布于上皮细胞胞质及部分胞核，Bcl-2阳性表达主要分布上皮细胞胞质，相应的部位呈棕黄色的颗粒表示阳性。 　　1.6.2 细胞计数相关标准 计数于显微镜下进行，统一进行（×40）放大，由三名专业操作，独立随机选择等距的每张切片5个视野，分析系统5个视野阳性的细胞数量，并取平均数。 　　1.7 统计学分析 　　所有数据应用SPSS19.0软件包完成统计分析，一般资料应用（）完成表示，计量资料应用t完成检验，计数资料应用x2完成检验，当P0.05）。 　　3 讨论 　　机体组织内的BP1蛋白发现于行β珠的蛋白表达相关调控时，克隆出的BP1的cDNA长度是1254bp，由240个氨基酸进行编码，结构域呈现为螺旋状同源异性。同时BP1蛋白同家族是DLX，BP1也可称DLX9。 　　BP1蛋白是新近发现的转录因子与人类乳腺癌发生密切相关，有研究表明BP1的高表达与多种恶性肿瘤的发生密切相关。有研究在急性白血病中BP1的表达高于正常人，其主要机制为BP1在肿瘤的形成中发挥上游因子