苯并a芘对养殖黑鲷sparus macrocephaluscyp1a1基因表达及其酶活性的诱导研究-study on the induction of benzo a pyrene to the gene expression and enzyme activity of sparus macrocephaluscyp 1a1 in cultured black porgy.docxVIP

摘 摘 要 I I 摘 要 在对水生生态系统污染监测中,鱼类 CYP1A 的诱导已被作为暴露于 PAHs、 PCBs、二噁英以及相关化合物的早期预警信号及高度敏感的生物反应。本研究 利用生物学方法探讨 PAHs 的典型代表物 BaP 暴露对养殖黑鲷的 CYP1A1 mRNA 的诱导和对肝脏 EROD 活性的影响，以期在分子水平筛选出合适的生物 标志物，检测水环境中有机污染。取得以下结果： 1. 从养殖黑鲷（Sparus macrocephalus）的肝脏中克隆得到 CYP1A1 cDNA （Genbank 登录号 DQ898145），经过序列分析比对，和鲷科其它鱼类的 CYP1A cDNA 同源性大于 90％，含有 P450 cDNA 和 CYP1A cDNA 的特征 序列，是 CYP1A 亚家族的新成员。 2. 利用 RT-PCR 方法检测 BaP 暴露对黑鲷肝脏 CYP1A1 mRNA 表达的影响。鱼体 在暴露于 BaP6h 后肝脏 CYP1A1 mRNA 的表达就受到诱导，不同浓度组达到 最大表达量的时间不同，5μg/L 组和 0.2μg/L 组在诱导后 12h 表达量最大， 1μg/L 组在诱导后 24h 达到最大，之后下降到正常甚至低于正常水平。 3. 利用 Dot－blot 方法检测 BaP 暴露对黑鲷肝脏 CYP1A1mRNA 表达的影响。 在诱导 6h 后