宝钢废气生物处理塔中微生物群落的分子生态学分析-molecular ecology analysis of microbial communities in baosteels waste gas biological treatment tower.docxVIP

^=飞i簿；宝钢废气生物处理塔中微生物群落的分f生态学研究摘要摘要随着环境科学的发腱，对环境微生物群落的分析越来越重要。由于传统的基于培养的微生物分析方法存在缺陷，不能满足环境分析的要求；近年来发展起来的分子生态技术可以较好的解决传统方法的缺陷。本研究利用分予生态学技术分析了宝钢废气生物处理塔中微生物群落的生物多样性和部分微生物的系统进化关系。通过实验得到的主要研究结论如下：1．通过三种总DNA提取方法的对比，确定了一种操作简便、不需要购置专用设备的总DNA提取的化学方法；并用此方法提取了苯塔、酚塔和吡啶塔样品的总DNA，所得总DNA可以满足环境微生物群落分析的要求。2．根据PCR原理和样品的特点，探讨得出了合适的PCR反应体系和反应程序；运用此条件对宝钢废6t生物处理塔中的样品进行了PCR扩增，所有样品都得到，250bp左右的特定DNA片段，此结果的片段大小和实验没计结果才H吻合；此条件PCR扩增的产量能够满足DGGE分析的要求；实验中还解决了PCR扩增污染的问题。3．利用DGGE分离技术，对PCR扩增得到的各样品的特定DNA片段进行了分离，在各个样品中都可以分离出三十条以上的单一条带，初步得出了生物塔巾的微生物群落的生物多样性和微生物的大致数量比例关系；通过同一生物塔中不同位鼹和不同时间的微生物群落的变化情况初步分析了外界条件对微生物群落结构的影响。4．对DGGE分离的部分单一DNA条带进行了测序，利用Blast软件对测序结果在GenBank数据库中进行了同源性对比，所得结果大部分为不可培养微生物，这是传统方法分离不到的微生物；利用BioEdit软件对各生物塔测序条带进行了进化系统分析，画出了无根进化树，得到了它们之问的系统进化关系。关键词：分子生态学生物信息学聚合酶链式反应变性凝胶梯度电泳【IH请同济大学工学硕士学位论文】@宝钢废气生物处理塔中微生物群薄的分子生志学研究ABSTRACTABSTRACTWith血edevelopmentofenvironmentalscience．analysisoncommunityofenvironmentalmicroorganismshasbecomemomandmomimportant。Becausethetraditionalanalyticalmethodhasdefects，itcan’tmeettherequestforenvironmentalanalysis．Defectoftraditionalmethodcanbesettledbyecolo画caltechnologyofmeleculedevelopedinrecentyears．Inthisresearch．thediversityofcommunityofenvironmentalmicroorganismandtheevolutiverelationofsomemicroorganismintheWaStegashie-absorptiontowerofBaoganghavebeenanalyzedbymolecularecologicalmethod．髓emainresearchconclusionreceivedthroughtheexperimentisasfollows：1．UnderthecontrastofthIeetotelDNAextractingmethods，oneeasXsimpleandnon—specialdevicechemicalmethodofcrudeDNAextractionwasfound．ThecrudeDNAofthesamplesfrombenzenetower,phenoltowerandpyridinetowerwereextractedwimthismethod．thecrudeDNAcanmeettherequestofanalysisonmicrobialcominunity．2．AccordingtoPCRprincipleandcharacteristicofsample．力】esuitablesystemandprocedureofPCRreactionhavebeenacquired．UnderthOSecondidons，PCRexperimentsofthesamplesfromgas—disposalbio-packingtowerofBaogangwel3edone．allsamplesgotthespecificfragmentsofDNAwhosesizeisabout250bp．髓cresultofsizeisidenticalwithexperimentaldesign．Bythisway,theoutrlUtofPeRampl