草鱼ctenopharyngodonidellahsp90 wap65基因的克隆 表达特性及功能分析-cloning, expression and functional analysis of ctenopharyngodon idellus ctenophila hsp 90 wap 65 gene.docxVIP

飞飞摘要草鱼(C伦以嘶口秒豫D如刀娩盯砷HSp90(CiHSp90，GU258544)克隆于草鱼肝肾cDNA文库。CiHsp90全长为2793bp。C讯Sp90有广谱的本底组织表达，经34℃短暂诱导后，其表达水平有一定的上调。为了解CiHsp90的功能，一方面，克隆了ATPaSe结构域cDNA与载体连接后转化大肠杆菌进行4℃冷、42℃热激保护实验。另一方面，原核表达、纯化获得该目的多肽P朋Pasc，将n册敬进行柠檬酸合成酶凝集实验。CiHsp90除了对大肠杆菌有冷，热保护作用外，在高温状态时能够降低柠檬酸合成酶的凝集程度。Wap65是机体参与温度调节和免疫应答反应的一种应激蛋白，它在鱼类适应变温生活等方面起重要作用。本文在经P01yI：C诱导的草鱼肝肾cEINA文库中筛选并克隆了1个Wap65(HM629798)。草鱼W．ap65全长cDNA为1510bp。进化树显示，草鱼W5与斑点叉尾鲴晰5-2进化关系最近。定量PCR研究草鱼脚钌的表达特征，结果表明：脚酊在肝中有较强的本底表达，而在脾、肾、脑和肠等组织中该基因表达非常微弱。34℃热激2h后，在脾脏中，脚酊的表达量有一定的上调；在肝脏中该基因的相对表达量大量增加，而在其他受检组织中脚酊的表达无明显变化。PolyI：C诱导以后，在脾脏中，W却65的表达量有一定的上调；在其他受检组织中无明显变化。LPS诱导以后，在受检组织中的表达量都