生物医学概论生化第2章生物大分子_PPT课件.ppt

链长越长，解链温度越高 G+C 含量越高，解链温度越高。 解链曲线的变化 变性的核酸可以复性或形成杂交双链 当变性条件缓慢地除去后，两条解离的互补链可重新配对，恢复原来的双螺旋结构，这一现象称为DNA复性(renaturation) 。 减色效应：DNA复性时，其溶液A260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 在DNA变性后的复性过程中，将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) DNA-DNA 杂交双链分子 变性 复性 不同来源的DNA分子 研究DNA分子中某一种基因的位置。 监定两种核酸分子间的序列相似性。 检测靶基因在待检样品中存在与否。 核酸分子杂交的应用 分子杂交实验 ① ② ③ DNA芯片技术 5? Primer 1 5? Primer 2 Cycle 2 Cycle 1 5? 5? 5? 5? 5? 5? Template DNA PCR技术的工作原理 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? Cycle 3 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 25～30 次循环后，模板DNA的含量可以扩大100万倍以上。 第三节酶的结构与功能 酶是一类对其特异作用物（底物）具有高效催化作用的蛋白质。 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP NADP+ NAD+ 核酸是由多个核苷酸之间通过3’-5’磷酸二酯键连接形成的高分子化合物。 5′端 3′端 C G A （五）核苷酸的连接方式 及结构表示方式 书写方法 5? A C T G C T 3? 核酸一级结构定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 核酸分子大小常用碱基数目（base或kilobase)表示。 二、 DNA分子的高级结构和功能 （一）DNA的二级结构——双螺旋结构 碱基组成分析 Chargaff 规则：[A] = [T] [G] ? [C] 碱基的理化数据分析 A-T、G-C以氢键配对较合理 DNA纤维的X-线衍射图谱分析 Rosalind Franklin Watson and Crick 1. DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953） （1）两条反向平行的脱氧多核苷酸链围绕同一个螺旋轴形成右手螺旋结构。 （2）脱氧核糖和磷酸基团组成的亲水性骨架位于双螺旋结构的外侧，疏水的碱基位于内侧，两条链对应的碱基通过氢键配对（互补配对形式：A=T; G?C） 。 碱基互补配对 T A G C （3）相邻碱基对平面产生疏水性作用力（碱基堆积力）和互补碱基对间的氢键共同维系着DNA结构的稳定。 3. DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 超螺旋结构(superhelix 或supercoil) DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。 正超螺旋(positive supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方同相同 负超螺旋(negative supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方向相反 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是 核小体(nucleosome)。 核小体的组成 DNA：约200bp 组蛋白：H1 H2A，H2B H3 H4 4. DNA的功能 DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转录的模板。 基因(gene)是指DNA上的功能片段，其中的碱基序列决定了基因的功能。 DNA的结构具有足够的复杂性和稳定性，满足遗传多样性和稳定性的需要。同时也会发生重组和突变，为自然选择提供机会。 三、 RNA分子的高级结构和功能 RNA与蛋白质共同负责基因的表达和表达过程的调控。 RNA通常以单链的形式存在，但有复杂的局部二级结构或三级结构。 RNA比DNA小的多。 RNA的种类、大小和结构远比DNA表现出多样性。 动物细胞内主要的RNA种类及功能 RNA种类 缩写 分布 功能 信使RNA mRNA 细胞核、细胞质、线粒体 蛋白质合成模板 转运RNA tRNA 细胞核、细胞质、线粒体 转运氨基酸 核糖体