创制重组自交系和回交导入系分析超表达的1ax1和1dx5亚基对小麦食品加工品质参数的影响-creating recombinant inbred lines and backcross introgression lines to analyze the influence of overexpressed 1ax1 and 1dx5 subunits on wheat food processing quality parameters.docx

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名： 日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□，在年解密后适用本授权书。不保密?。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日摘要高分子量麦谷蛋白亚基（HMW-GS）对小麦的食品加工品质起主要作用，其中1Ax1 和 1Dx5+1Dy10 是与食品加工品质和面筋强度相关的优质亚基。因此研究者以1Ax1、1Dx5+1Dy10 或 1Dx5 等为外源目的基因创制转基因小麦，以期达到改良小麦 食品加工品质的目的。但是，绝大多数成功的小麦遗传转化的受体局限于转化率高、 但产量和适应性等性状却较差的模式品种。因此，利用基因枪介导的遗传转化结合传统杂交回交的方式将模式小麦品种的优质外源转基因导入到优良小麦品种是获得 优质转基因小麦新品种的另一种可能途径。为此我们利用已获得的转基因株系（B102-1-2/1（含外源 1Ax1），B72-8-11b 和 B73-6-1（含外源 1Dx5））与湖北主栽优 良小麦品种（鄂麦 12、川麦 107、鄂麦 18）进行杂交和/或回交，利用系谱选择法结 合 SDS检测，获得了 2 个重组自交系（Recombinant inbred lines，RILs）和 5 个回交导入系（Introgression lines，ILs），获得了外源 1Ax1 或 1Dx5 得到预期超表达 并且 HMW-GS 组成各异的纯合株系，通过对所有纯系后代的分析，获得以下主要研 究结果：(1) 外源 1Ax1 或 1Dx5 在所有 RILs 和 ILs 中都能够稳定遗传和超量表达，证明 了利用基因枪介导的遗传转化结合传统杂交回交的方式将模式小麦品种的 外源转基因导入到优良小麦品种从而改良食品加工品质的可行性；(2) 所有株系中，超表达的 1Ax1 或 1Dx5 并未引起内源 HMW-GS 的沉默，也没 有新亚基的出现，但是超表达的 1Ax1 或 1Dx5 会引起内源 HMW-GS 以及其 它储藏蛋白的补偿效应，含有超表达 1Dx5 的 ILs 中的补偿效应更明显；(3) 在鄂麦 12、鄂麦 18、川麦 107 三个遗传背景中，超表达的 1Ax1 均能改善 面筋强度，在原来不含 1Ax1 的鄂麦 12 和川麦 107 的背景中改善效果更加 明显，而在已含有内源 1Ax1 的鄂麦 18 背景中面筋强度改善程度较小；(4) 获得了川麦 107 与 B102-1-2/1 杂交产生的相对完整的 ILs。分析结果表明， 超表达的 1Ax1 与内源不同 HMW-GS 的组合对食品加工品质参数的影响不 同：超表达的 1Ax1 与 1Bx17+1By18 和 1Dx2+1Dy12 的组合其揉混参数最佳，I在 1Ax1 超表达的背景下，亚基 1Bx17+1By18 对后期耐揉性（参数 RBD）贡献最大，亚基 1Bx7+1By9 对前期水合过程（参数 MPV）贡献显著，亚基 1Dx2+1Dy12 通过调节 x-型和 y-型亚基的平衡从而改善食品加工品质（面筋 强度）；(5) 在鄂麦 12、鄂麦 18、川麦 107 三个遗传背景中，1Dx5 的超表达均引起 ILs 面筋强度的过度增加，使面团呈现出不正常的揉混特性，导致食品加工品质 并未得到改善；(6) 鄂麦 12 与 B73-6-1 杂交产生的 ILs 中，有一个株系丢失了因父本转基因过 程出现的与 1Dx5 伴生的未知条带 5，，并且由于这一未知条带 5，的缺失，这 个株系的揉混特性与其他株系明显不同；(7) 川麦 107 与 B102-1-2/1 杂交产生的 ILs 的农艺性状接近轮回亲本川麦 107， 明显优于父本 B102-1-2/1，有些株系（如 C4a）的部分性状甚至优于川麦 107； 本研究证明了利用基因枪介导的遗传转化结合传统杂交回交的方式是改良 小麦食品加工品质的一条有效途径。本文的研究结果为优质转基因小麦育种 提供了一条新的研究思路；并且已获得的小麦株系又可以作为小麦品质改良 的优良材料。关键词：小麦，食品加工品质，面粉揉混特性，1Ax1，1Dx5，重组自交系，回