生物传感器的研究二十年的总结.docVIP

生物传感器研究二十年的总结山东省生物传感器重点实验室冯德荣一、 前期研究历史　　生物传感器研究和开发的目的是向社会提供采用生物传感器原理的新仪器和分析控制方法，它们可以广泛地应用于临床诊断和监护、食品分析、工业控制和环境状态的监测。　　我们生物传感器的研究起步于1983年[1]。1986年山东省科委鉴定了第一项生物传感器成果：血糖速测仪的研制,它采用氧电极作生物反应中的换能器，以葡萄糖氧化酶为活性材料，用流动注射的方式实现分析流程(图1)。1988年我们又完成了维生素 Ｃ传感器（氧电极型）的研究(图2)。虽然在实验室的条件下，以氧电极为换能器的生物传感器比较容易得到预期的研究结果，但是我们发现，传感器的稳定性很难控制，在应用中会经常碰到传感器输出信号的稳定性问题(如电化学传感器放置中信号的变化、氧电极测定中温度变化造成的溶解氧信号的变化)，使得构建成的测定系统转化成商品，由用户来实现测定十分困难。因此为数众多的我国生物传感器研究机构都面临着深入研究稳定的生物传感器，并把它们在实践中应用的困境。图1、早期的血糖速测仪图2、维生素C速测仪我们在生物传感器实用化上取得突破性进展的标志是SBA-30型乳酸分析仪的开发成功(图3)[2]，它成为我国九十年代耐力竞技体育训练的主要科学仪器之一。追溯SBA-30型乳酸分析仪研究开发成功的经验，在整整八年的实验技术积累中，我们主要解决了以下四个技术难题：①研究了使生物材料能够制成薄膜的固定化技术，使酶膜既能长时期运行不用更换，还可以长期贮存和运送，这是生物传感器商品化的一项基础的前提；②研制了一种比氧电极更为稳定的换能器，即过氧化氢型电极，它可以在生物传感器测定条件下，高度稳定地保持的基础电流的输出；③解决了生物传感器信号处理的电子技术；④研制了一系列使生物传感器反应精确进行的分析装置配套条件。这些技术难题的解决，为生物传感器技术传播创造了良好的技术基础。图3、我国第一种实用化的生物传感器---SBA-30型乳酸分析仪二、 九十年代的生物传感器研究　　在基本解决上述技术难题的基础上，1992年我们完成了SBA-40型谷氨酸葡萄糖双功能生物传感分析仪的研制(图4) [3]。这是我们进入生物传感器自主创新研究开发的重要标志，我们的仪器设计包括了20多种智能化程序，其主程序满足了双电极系统的直接自动测定。谷氨酸传感器的研制成功并进入实用是国际首创，由于我国是世界上的味精大国，味精产量居世界第一，因此40型仪器的问世很快得到工厂用户的关注。它与葡萄糖、乳酸传感器一起成龙配套地监测控制发酵罐内的物质成分的变化（每年在我们向全国有关单位提供固定化酶膜共1500个，实现分析150万次/年），至今国际上还没有大规模应用生物传感器于工业测量实例的报道，它为味精行业提供了精确的生化成份检测和控制手段。由于工业生产是一种连续不可间断的生产过程，要求生物传感器产品能耐受各种温度变化、连续、电压波动等比较粗放的环境条件，SBA生物传感器几经改造，在技术上已经基本适应这一条件，经过7年多在几家大型味精企业集团使用的考验，已证明SBA-生物传感器能够连续不停地24小时长期运转。图4、SBA-40型谷氨酸葡萄糖双功能分析仪九十年代我们还进行了一系列的新型生物传感器的研究，同时不断地寻求生物传感器的各种服务对象。我们在拓展生物传感器的应用领域方面主要完成了以下几方面的工作：　　1、研制了多酶协同作用的复合酶膜生物传感器。1993年研制成功的尿素生物传感器[4]，它的关键部件是3种酶复合而成的固定化酶膜圈，装配在过氧化氢电极上，可以测定血液或尿液中尿素的变化，目前已有近20家卫生防疫和体育训练单位的用户，可以用来检测人或动物运动后的疲劳程度。　　2、用智能化计算机实现检测中生物反应的自动控制。微型计算机引入生物传感器的测定仪器装置大大改善了生物传感器的性能，实现了原先难于一步性直接得到结果的分析项目快速测定，例如糖化酶的测定[5]：经典的方法是繁琐的碘定量法。在生物传感器测定糖化酶的过程中，通过微机程序，可以让糖化酶测定底物在前20秒中预混合，并使葡萄糖电极对底物中产生干扰影响的葡萄糖反应基本完成，然后在1-2分钟内检测计量随后的由底物和酶反应中释放出的葡萄糖。用SBA生物传感分析仪(图5)测定糖化酶的活性比传统方法快了几十倍[5]。图5、SBA-50型糖化酶生物传感分析仪3、用双电极-差分的方法获得原先难于分析的生化样品测定。由于采用微机技术，许多原先不容易获得的分析测定项目，包括尿素、谷氨酰胺、淀粉、蔗糖、乳糖、麦芽糖等，都已能够通过双电极的差分方法由生物传感器自动分析来得到。方法的要点是：一个电极装配有谷氨酸、葡萄糖或乳酸酶膜，另一个电极装配有谷氨酸、葡萄糖或乳酸酶膜与要分析样品的分解酶的混合物。二个电极用标准物