第8章紫外可见吸光光度法及分子荧光分析法35207.pptVIP

* * * * * * * * 分光光度计在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，或是仪器工作不正常时，都要进行波长校正。正常工作的仪器每隔一个月也要检查一次波长，必要时进行校正。校正波长是为了检验波长刻度与实际波长的符合程度，并通过适当方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的吸光度测定误差，提高测定的准确性和灵敏度。 * 2） 光电比色法 光电比色计结构示意图 通过滤光片分出一窄范围的光(几十nm，近似单色光)，照射样品池，测量的是吸收光的强度 吸收滤光片：只允许指定的窄范围波长光透过，其他波长的光均被吸收 光电比色法的局限性： （1）预先知道吸收波长 （2）单色光不纯 （3）只限于可见光 * 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 2 分光光度法 特点：（1）可连续分出纯度较高的单色光 （2）精确，可选择最大吸收波长 （3）应用范围可扩展到紫外光和红外光区，对应称为紫外分光光度计、红外分光光度计 （4）可进行多组分的测定 * 单波长单光束分光光度计：一束单色光轮流通过参比和试样溶液，由于电源波动引起的误差较大——简易型分光光度计 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 分光光度计的类型 * 单波长双光束分光光度计 比值 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 光束分裂器 * 双波长分光光度