生理实验大纲杨.docVIP

实验一 ABO血型的鉴定[目的要求]加深理解血型分型的依据及其意义；学会一种鉴定血型的方法。学时：2[提问]1、确定ABO型的依据是什么？怎样确定？2、ABO血型相同的人任何情况下都能相互输血吗？试说明原因。[原理]用已知的凝集素（如抗A、抗B）的标准血清，鉴定被检查者红细胞上未知的凝集原（如A凝集原或B凝集原），红细胞上含何种凝集原即为何种血型。[实验用品]A型和B型标准血清，采血用具，玻璃，牙签，75%酒精棉球，玻璃蜡笔等。[实验对象]人[方法步骤]1、玻片法（1）取双凹玻片一块，用玻璃蜡笔在两端分别标以A、B字样。（2）在A侧中央滴A型标准血清一滴，在B侧中央滴B型标准血清一滴。（3）消毒手指或耳垂后，针刺取血1～2滴于盛有1ml生理盐水之试管混匀，制成红细胞混悬液。分别用二根牙签取混悬液加入A型和B型血清中，并将玻片转动数次后，使其充分混匀，放置10～15分钟观察结果。2、试管法取小试管两只，分别标明A、B字样。按玻片法在两管分别加入A型和B型标准血清及受检者红细胞悬液各一滴，振荡混合后，立即离心一分钟（1000转/分）。取出试管后，轻轻摇起沉淀物，观察结果。[观察项目]两种方法都先用肉眼观察是否发生凝集反应。如不能确定，再在低倍镜下观察。[实验结果]以玻片法为例，结果如下（图11）：[结果分析]1、甲玻片上红细胞在A、B两种标准血液中都不发生凝集，说明红细胞上A、B两种凝集原都没有，则血型为O型。2、乙玻片上红细胞在A型标准血清中不凝集，在B型标准血液中发生凝集，说明红细胞上含A凝集原，则血型为A型。3、丙玻片与乙玻片刚好相反，说明红细胞上含B凝集原，则血型为B型。4、丁玻片上红细胞在A、B两种标准血清中都发生凝集，说明红细胞上含有A、B两种凝集原，则血型为AB型。[结论]红细胞上的A、B凝集原被测知，即可作出ABO血型鉴定。[注意事项]1、实验前对所用A、B两种标准血清要经过校准，合格者才能用。2、加入玻片或试管中的A、B两种标准血液切不可混淆错乱。3、制备红细胞混悬液摇匀时，不可用力摇振，要轻轻将试管来回倒置，以防红细胞破裂溶血。4、玻片或试管内加入红细胞混悬液时所用牙签要分别专用，不能两侧共用。[异常现象讨论]本实验一般不会出现异常情况，但有时所测血型与某人原来正式鉴定过的血型不相符，其原因一方面可能所采用的标准血清存放时间过长，已失去标准血清的作用，需要用重新校准的新鲜标准血清；其次可能系实验场所不清洁，红细胞悬液及血清有严重污染而产假凝集。[思考题]若无标准血清，已知某人血型为A型或B型，能否用来鉴定他人血型？如何鉴定？实验二 反射弧的分析[目的要求]分析反射弧的组成部分，加深理解反射与反射弧的概念，证明反射弧的完整性与反射活动的关系。学时：2[提问]1、什么叫反射？2、反射活动的物质基础是什么？[原理]在中枢神经系统参与下，机体对刺激所产生的规律性的反应活动称反射。反射的实现必须有完整的反射弧。反射弧的任何一部分受破坏，均不能出现反射活动。由于脊髓是中枢神经系统的低级部位，机能比较简单，便于观察，所以往往用脊蛙作为实验对象。[实验用品]蛙板，刺蛙针，粗剪刀，玻璃针，镊子，铁支架，双凹夹，小烧杯，培养皿，棉线，0.5%与1%硫酸液，滤纸片，药棉等。[实验对象]蟾蜍或蛙[方法步骤]1、制备脊蛙 用刺蛙针破坏蛙的脑部，保留脊髓，称为脊蛙。刺蛙针拔出后，以小棉球堵塞伤口止血。2、分离左侧坐骨神经 将蛙俯卧于蛙板上，在左大腿背面作一纵行皮肤切口，用玻璃针分离肌肉，钩出坐骨神经，在其下穿线备用。3、悬挂脊蛙 用肌夹将蛙下颌夹住挂在铁支架上，待蛙四肢松软后再进行实验观察。[观察项目]1、用浸湿0.5%硫酸滤纸片贴于右足趾皮肤，观察有无屈腿反射。2、环绕右大腿切开皮肤，彻底剥去该下肢皮肤，用0.5%硫酸滤纸片贴于该下肢无皮肤区，观察有无屈腿反向。3、用0.5%硫酸滤纸片贴于左足趾皮肤，观察有无屈腿反向？然后剪断左侧坐骨神经，重复上述操作，观察有无屈腿反向。4、用1%硫酸滤纸片贴于蛙腹部皮肤，观察蛙有何反射活动？5、用探针插入脊蛙椎管，捣毁脊髓，再重复操作4，观察蛙有无反射活动？[结果及分析]1、产生右下肢屈腿反射，因为反射弧五个部分完整：皮肤感受器→传入神经→脊髓中枢→传出神经→屈肌收缩。2、无屈腿反射，因皮肤感受器被破坏。3、坐骨神经完整时，有屈腿反射，因反射弧完整。剪断坐骨神经后，无屈腿反向，因传入与传出神经被破坏。4、右下肢产生屈伸活动，因腹部皮肤感受器完整可以传入，右下肢传出神经与效应器也完整。左下肢无屈伸活动，因其坐骨神经已剪断。5、捣毁脊髓，破坏了反射中枢，故刺激腹部皮肤，右下肢也无屈伸活动。[结论]反射弧的任何一部分受损，反射活动即不能出现。[注意事项]1、捣毁蛙脑时不能损伤脊髓，以免破坏反射中枢