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四种植物细胞有丝分裂观察与比较 　　摘 要 针对“观察植物细胞的有丝分裂”实验，对洋葱、大蒜、风信子和水仙等四种材料根尖的有丝分裂情况进行了对比研究，实验结果表明只要处理方法得当，均可获得满意的观察效果。 　　关键词 实验材料 有丝分裂 实验改进 分裂指数 　　中图分类号 G633.91 文献标识码 B 　　“观察植物细胞的有丝分裂”是普通高中生物课程标准中要求完成的一个基本实验，活动的目标是通过学习掌握植物细胞有丝分裂制作技术，观察植物细胞在不同分裂时期的染色体的变化特征。该活动推荐的观察材料是洋葱根尖，而在教学实践中，许多材料只要处理方法得当，均可以在一个装片中找到有丝分裂各期的细胞，现将大蒜、风信子、水仙与洋葱等四种实验材料的装片制作过程和结果比较如下。 　　1 实验材料的准备 　　1.1 根尖的培养与预处理 　　大蒜与洋葱成熟后进入休眠期，需低于10℃以下方能解除休眠。两种材料在根尖培养前喷少量水后装进袋子，放入冰箱冷藏室3～5 d，有利于解除休眠，促进发根。 　　除去洋葱、水仙、风信子外层干死的鳞片叶，剥去大蒜瓣的膜质枯衣，用细竹签串起蒜瓣，选择杯口适中的烧杯，让实验材料的底部与烧杯的水接触，每天换水，室温培养至根长到2 cm左右时，将培养装置放入4℃冰箱低温处理24 h。 　　1.2 根尖的固定 　　于上午10：30～11：30，取洋葱、水仙和风信子的根尖和已发根的蒜瓣（大蒜根较细，待需要时再剪取），用卡诺氏固定液浸泡24 h，经体积分数为80%的乙醇溶液处理0.5 h后再转移到70%的乙醇中，放入4℃冰箱备用。 　　2 临时装片的制作过程 　　剪取根尖2～3 cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精的混合液（1∶1）的培养皿中进行解离。待根尖酥软后，用镊子取出放入盛有清水的培养皿，反复漂洗若干次，取出根尖放在载玻片中，用镊子截取含分生区的乳白色根尖尖端（2～3 mm），去除根尖其余的部分。滴一滴改良苯酚品红染液，用镊子的钝头在染液中直接将根尖捣碎，染色几分钟后盖上盖玻片，用吸水纸覆盖在盖玻片上。在平坦的桌面上用铅笔带橡皮头的一端轻轻敲打盖玻片，使材料离散成均匀的云雾状。四种材料临时装片制作的过程比较见表1。 　　3 结果与分析 　　3.1 四种材料的制片特点 　　从四种材料的发根效果看，洋葱生根最少，发根不整齐；大蒜最容易发根，根尖生长速度一致、生根较多，1个蒜瓣的生根量相当于1个洋葱头；水仙和风信子在11～12月上市，上市后水培容易生根，发根整齐。 　　解离是本实验的关键环节，解离的时间与根的粗细和胞间层的紧密程度有关，充分解离的根尖组织更容易在压片后的离散。从制片的时间看，以四种材料制片的时间比较：水仙风信子洋葱大蒜。 　　由于将材料置于染液中捣碎，直接减少了取材时镊子对材料的吸附和染色所需的时间。 　　3.2 四种材料的观察效果 　　分别将装片置于显微镜下观察，其中染色体着丝点排列在中央平面上的为中期；染色体平均分配到细胞两极的为后期；刚刚进入前期的细胞与间期的细胞不容易区别，只能从细胞核部位仔细区别，看到染色体形态的判断为前期，否则为间期。每种材料观察200个装片，每个根尖观察l0个视野，每个视野中均可找到分裂相的细胞（图1），装片观察效果对比见表2。 　　记录每个视野的总细胞数和分别处于有丝分裂前期、中期、后期、末期的细胞数，按公式有丝分裂指数=有丝分裂细胞数/观察细胞总数×100%计算有丝分裂指数，统计结果见图2。 　　以上结果显示四种材料均为观察植物细胞有丝分裂的良好材料，这主要是因为这些材料的细胞体积较大，细胞核明显，染色体数目都比较少，染色体大，细胞分裂期时间较长，处于分裂相的细胞较多，易于观察和比较。但由于四种材料都收到季节的限制，因此要求教师根据地域与季节选择不同的实验材料，并适当进行预处理，在分裂的高峰期进行固定，固定后的根尖不仅可以随时取用，并能在一定程度上缩短解离时间。总之，只要处理方法恰当，均能在同一装片中观察到有丝分裂各期的细胞，适合选择用于不同学段的分组实验。 　　4 讨论 　　4.1 对教材实验步骤的改进 　　预处理：大蒜和洋葱采摘后进入后熟期，遇上夏秋季休眠期不容易发根，将其放入冰箱冷藏室若干天有利于解除休眠促进发根。低温预处理可以改变细胞质的黏度，使染色体适度缩短，并有利于分散，处理24～30 h能明显促进根尖细胞的有丝分裂活动和提高细胞分裂指数，尤其是分裂中期的细胞数目有明显增加。 　　解离：教材中关于解离的描述是“剪取根尖2～3 mm解离3～5 min”，由于2～3 mm的根尖酥软后不容易夹取，因此取2～3 cm或较长根尖进行解离、漂洗，待制片时再用镊子截取2～3 mm根尖进行染色。应根据根尖的粗细和胞间层的紧密程度来确定解离的时间，可用镊子轻夹成