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遗传工程课件
第十一章 遗传工程;什么是遗传工程？;工具酶;限制性内切酶II及其产生的3种不同末端;同切酶和同粘酶;Sma I
5′ ... C C C^G G G ... 3′
3′ ... G G G^C C C ... 5′ ;连接酶及其对底物的要求:
T4 Ligase, Ecoli Ligase;聚合酶(polymerase): DNA聚合酶I, klenow片段, Taq, Pfu, 末端转移酶
外切核酸酶(exonuclease): exo III, S1核酸酶, DNase I
脱磷酸酶(dephosphatase): 碱性磷酸酯酶CIP
磷酸化酶,激酶(kinase)
逆转录酶(reverse transcriptase)
RNase H, RNase A
甲基化酶(methylase);载体及其构成基本要素;常用载体;宿主;常用宿主;lacZ;;; ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????
;;;如何提高克隆效率?;问题:;不依赖于内切酶和连接酶的体外重组
----位点专一性重组
（依赖于短片段同源序列的重组）;LoxP;Transform;;;新鲜组织研磨或匀浆;;;筛选DNA文库;探针标记;变性;Synthesize Radioactive PROBE;;;;REMOVE;Inserted DNA coding
Protein for detection;PCR技术及其应用;;;;;;其他常用分子生物学技术;转基因动植物和基因治疗;iRNA作用原理; ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????
;5′???C A U G???3′?????mRNA 3′???G U A C???5′?????Antisense RNA ;转基因植物实例;基因治疗;血友病B的基因治疗
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