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荭草提取物肠外翻吸收研究 　　[摘要] 利用肠外翻模型研究荭草提取物不同剂量在大鼠不同肠段的体外肠吸收特征。采用UPLC-MS/MS检测不同肠段中原儿茶酸，异荭草素，荭草素，牡荆素，木犀草苷，槲皮苷及山柰素鼠李糖苷含量，比较荭草提取物中各化学成分在各肠段的吸收情况，并计算提取物中各成分的吸收参数，用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析处理，分析考察对吸收参数影响的显著性，进一步分析其在不同部位的吸收特征。荭草提取物不同浓度时原儿茶酸等7种成分在不同肠段的吸收均为线性吸收，其回归相关系数（R2）均大于0.95，符合零级吸收速率，肠吸收速率（KA） 随着荭草提取物浓度增加呈线性增加（R20.95），表明各成分以被动扩散机制吸收；所考察成分在不同肠段肠囊的吸收速率存在不同程度的差异，各成分在各肠道的吸收趋势为十二指肠、空肠、回肠大于结肠。肠囊对荭草中化学成分的吸收透过有选择性，外翻肠囊法可评价其多成分的肠吸收特性。 　　[关键词] 荭草；肠外翻；吸收；UPLC-MS/MS；吸收速率常数 　　[收稿日期] 2014-01-04 　　[基金项目] 国家自然科学基金项目； 贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目（黔科合中药字[2011]5081，黔科合重G字[2013] 4001） 　　[通信作者] 黄勇， 副教授， Tel： （0851） 6908899， E-mail：mailofhy@126.com 　　[作者简介] 刘跃，硕士研究生， Tel E-mail：liuyue_25215@126.com 　　荭草为蓼科植物荭草Polygonum orientale L. 的干燥全草，为贵州省地产药材，收载于《贵州省中药材质量标准》1988年版[1]，具有祛风利湿，活血，消积，止痛等功效，临床用于风湿性关节炎，冠心病，心胃气痛等[2]。课题组前期对荭草做了大量研究报道[3-5]，但其吸收机制及药效物质基础的研究还不够完善，基于“入血成分才可能是有效成分”的假说，本文采用大鼠肠囊外翻模型[6-7]，对荭草提取物透过肠壁的可被吸收成分进行分析，研究荭草提取物中各化学成分在不同肠段的吸收情况，有利于进一步明确其药效物质基础，并为荭草药物制剂剂型的研究提供理论依据与基础。 　　1 材料 　　1.1 仪器 　　Waters超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪（Acquity UPLC系统，MassLynx V4.1工作站，包括二元高压梯度泵、自动进样器、电喷雾电离源等）；Allegra64R低温高速离心机（美国Beckman Coulter公司）；MTN-2800D氮吹浓缩装置（奥特塞恩斯仪器公司）；超纯水机（四川沃特尔科技发展有限公司）；自制麦氏浴管；混合气体（95%O2，5%CO2）；DK-98-ⅡA恒温水裕锅（天津泰斯特仪器有限公司）。 　　1.2 试剂 　　葛根素（批号0752-9605）、原儿茶酸（批号809-200102）对照品购自中国食品药品检定研究院；异荭草素、荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷、山柰素鼠李糖苷对照品自制（纯度≥98%）；荭草提取物（批号090618）；盐酸维拉帕米（阿拉丁）；甲醇（HPLC级，天津科密欧化学试剂有限公司）；乙腈（HPLC级，德国Merck 公司）；实验用水为超纯水；其余试剂均为分析纯。 　　Tyrode液：称取NaCl 8.0 g， KCl 0.2 g， CaCl2 0.2 g， NaHCO3 1.0 g， NaH2PO4 0.05 g， MgCl2 0.1 g， 葡萄糖 1.0 g，加蒸馏水溶解后与溶解的CaCl2及葡萄糖混匀，蒸馏水定容至1 L即得。 　　1.3 动物 　　健康SD大鼠，雄性，体重为（250±20） g，由贵阳医学院动物中心提供， 批号SCXK（黔）2002-0001。 　　2 方法与结果 　　2.1 分析条件 　　色谱条件如下。Waters BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；Waters Van Guard BEH C18保护柱（2.1 mm×5 mm，1.7 μm），流动相为0.1%甲酸乙腈（A）-0.1%甲酸水（B），梯度洗脱（0～0.5 min， 15% A； 0.5～0.8 min， 15%～ 20% A； 0.8～3 min， 20%～25% A； 3～4 min， 25%～90% A；4～5 min， 90%～15% A），流速0.30 mL?min-1，柱温45 ℃，进样体积为2 μL。 　　质谱条件：采用电喷雾电离源（ESI），毛细管电离电压3 kV，离子源温度120 ℃ ；喷雾气与反吹气为氮气，去溶剂气流速650 L?hr-1，扫描方