栀子大黄汤配伍变化对枳实中总柚皮素和总橙皮素药动学影响.docVIP

栀子大黄汤配伍变化对枳实中总柚皮素和总橙皮素药动学影响 　　[摘要] 采用HPLC-UV测定枳实和栀子大黄汤灌胃后大鼠血浆中总柚皮素和总橙皮素浓度，血浆样品通过液液萃取法进行提取，通过酸水解的方式将柚皮素?橙皮素缀合物转化为游离柚皮素?橙皮素?Phecda C18色谱柱 （4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相0.1%磷酸-甲醇，梯度洗脱，流速1.0 mL?min-1?采用DAS 2.0 数据处理软件及SPSS 16.0 统计软件分别进行药动学参数计算及比较?枳实组（ZS）和栀子大黄汤组（ZZDHD）中总柚皮素?总橙皮素的药动学参数存在显著性差异，ZS组中总柚皮素的Cmax，AUC0-t分别比ZZDHD组的高出73.5%，65.9%，ZS组中总橙皮素的Cmax，AUC0-t分别比ZZDHD组的高出63.5%，119.1%?说明栀子大黄汤中其余成分对枳实中总柚皮素?总橙皮素的药动学特征具有显著影响，经配伍后其Cmax，AUC0-t显著降低?该方法简便准确?灵敏度高?特异性好，可以应用于血浆中总柚皮素和总橙皮素含量测定? 　　[关键词] 栀子大黄汤；配伍；HPLC-UV；总柚皮素；总橙皮素；药动学特征 　　[收稿日期] 2014-02-24 　　[基金项目] 国家自然科学基金项目 　　[通信作者] 冯芳，教授，研究方向为现代药物质量研究及评价，Tel：（025E-mail：fengfangl@163.com 　　[作者简介] 刘小雨，硕士研究生，E-mail：liuxy1990@126.com 　　目前临床所见酒精性肝病有逐年增多的趋势，居肝硬化病因的第2位?栀子大黄汤对酒精诱导的急性肝损伤具有保护作用，保肝作用的主要药效物质群为环烯醚萜类?黄酮类?蒽醌类[1]?枳实中异柚皮苷?柚皮苷?橙皮苷?新橙皮苷具有抗氧化?抗炎?抑制肝病毒?抗氧化?抗纤维化?抗肿瘤与抑制P450代谢酶活性等作用[2-7]；苷元柚皮素?橙皮素也具有类似的药理活性?这些活性物质对酒精性肝病的形成具有抑制作用?目前国内外关于柚皮素?橙皮素的药动学研究大多测定游离形式，但柚皮素?橙皮素的二相代谢物具有活性且占较大比例?不易获得对照品进行直接测定[8-9]，本研究采用酸水解的方法获得血浆中总柚皮素和总橙皮素的浓度，并应用于药代动力学研究，进一步发掘配伍规律，为其应用于酒精性肝病的临床治疗提供参考和依据? 　　1 材料 　　1.1 药材与试剂 　　柚皮素（批 ?橙皮素（批 ?黄芩素（批 均购自成都曼斯特生物公司，纯度皆98%；生栀子（产地福建，批号130701）?生大黄（产地甘肃，批号130701）?炒枳实（产地江西，批号130804） ?淡豆豉（产地河南，批号130425）均购于先声药店，经中国药科大学中药学院秦民坚教授鉴定栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，大黄为蓼科植物药用大黄Rheum officinale Baill的根和根茎，枳实为芸香科植物甜橙Citrus aurantium L. 的干燥幼果，淡豆豉为豆科植物大豆Glycine max L. Merr. 的成熟种子的发酵加工品?甲醇（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司）；磷酸（分析纯，南京化学试剂有限公司）；水为娃哈哈纯净水? 　　1.2 仪器 　　LC-2010C高效液相色谱仪（日本岛津公司），AnkeTGL-16B高速离心机（上海安亭科学仪器厂），AB135-S电子天平（梅特勒-托利多），AEU-210电子天平（日本岛津公司），XW-80A旋涡混合器（上海医科大学仪器厂），高速多功能粉碎机（上海冰都电器有限公司），RE-52CS型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）? 　　1.3 动物 　　健康SD大鼠（清洁级），雄性，体重（250±25） g，购自南京青龙山动物养殖中心?动物许可证号SCXK （浙） 2008-0033?饲养温度为20～25 ℃，饲养环境湿度为（45±10）%? 　　2 方法 　　2.1 汤剂的制备 　　2.1.1 栀子大黄汤（ZZDHD）制备 取栀子9 g，大黄3 g，枳实12 g，淡豆豉24 g，粉碎，加10倍量水浸泡30 min，武火煮沸后，文火煎煮30 min，4层纱布过滤；滤渣重复提取2次，合并3次滤液?滤液经旋转蒸发浓缩后制成ZZDHD冻干粉? 　　2.1.2 单味枳实汤剂（ZS）的制备 枳实12 g，用全方量药材10倍量的水浸泡30 min，武火煮沸后，文火煎煮30 min，4层纱布过滤；滤渣重复提取2次，合并3次滤液?滤液经旋转蒸发浓缩后制成ZS冻干粉? 　　2.1.3 冻干粉混悬液中柚皮苷橙皮苷与新橙皮苷的含量测定