荧光定量PCR技术讲座：理论基础引物及探针设计内参选择体系优化实验方案数据分析污染防控SNP及稀有突变检测.ppt

荧光定量PCR技术讲座 ------分子生物学实验技术系列讲座Ⅲ 郑州瑞德生物技术有限公司郑州瑞德基因技术研究中心 前言 现代生物科学完全是建立在实验技术上的一门学科，每一次技术的进 步都极大地提高了生物科学的理论水平。从显微镜的发明到细胞学说的诞 生，从孟德尔的豌豆实验到遗传学第一、第二定律的提出，从X射线衍射 技术对核酸结构的分析到DNA双螺旋结构模型的建立，从测序技术的进步 到人类基因组计划的完成......还没有哪一门学科的进步像生物学这样如 此依赖于实验技术的提升。 生命科学的进步完全依靠对生物体内微观生命现象的研究，这就要求 研究者在实验时必须严谨、精细，必须一丝不苟地注意实验中的每一个环 节，精细地操作每一步实验，一丝不苟的分析每次的实验结果，步步为 营，细节决定成败。 大纲 一、荧光定量PCR技术的基础理论 二、引物及常见荧光探针的设计 三、内参基因的选择 四、反应体系的优化 五、实验方案的选择 六、误差分析及操作规范 七、实验中污染的防控 八、SNP及稀有突变检测 九、实验结果的分析 一、荧光定量PCR技术的基础理论 1、荧光定量PCR技术概论 荧光定量PCR技术产生并成熟于上世纪90年代，由于该技 术实现了PCR从定性到定量的飞跃，能够对PCR反应的全过程进 行实时监控，并且自动化程度高，所以该技术从