遗传性疾病的分子诊断 - 上海交通大学医学院精品课程.pptVIP

g)蛋白截短测试验（protein truncation test，PTT） 从蛋白质水平检测由于碱基突变导致终止密码产生而使蛋白质合成提前终止产生截短的蛋白质。将正常人和病人的RNA逆转录成cDNA，并以cDNA作为模板进行PCR反应，扩增产物在体外经过转录，在无细胞提取液中能被翻译而合成蛋白质。所合成的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测时会出现比正常蛋白质截短的蛋白质。 * 3. 动态突变的检测 PCR技术 Southern印迹技术 * * 4.基因表达异常的检测 定量PCR技术 1. DNA结合染料技术 2. 水解探针技术(又称TaqMan probe)技术 3. 杂交探针技术(又称荧光共振能量转移技术 (fluorescence resonance energy transfer, FRET) * * （二）间接诊断所采用的技术 1. 双等位基因多态性 限制性片段长度多态性（RFLP） 第一代DNA的遗传标记，具双等位基因（bi-allele）多态性，所含信息量有限。 检测方法：Southern印迹技术 * 2. 多等位基因多态性 小卫星序列 　　　又称串联重复可变数目（variable number tandem repeats，VNTR), 第