实验十三 脓汁标的细菌学检验一.pptVIP

实验十三 脓液及穿刺液标本的细菌学检验（一） 一、目的要求 1.掌握脓液及穿刺液的标本采集方法 2.掌握脓液及穿刺液标本的细菌学检验程序 和方法 二、器材 1.标本： 脓汁模拟标本 2.培养基：BA 、Mac 3.试剂： 革兰染色液 4.其他： 玻片、接种环、酒精灯、显微镜等 三、常见致病菌 1、革兰阳性需氧菌: 金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肠球菌等 2、革兰阴性需氧菌: 肠杆菌科细菌、假单胞菌属等 3、厌氧菌: 拟杆菌属及其它厌氧杆菌、梭状芽胞杆菌、 厌氧球菌 4、其他： 放线菌、诺卡菌、白色念珠菌 四 步骤和方法 1.标本的采集： 注意防止正常菌群的污染 ①封闭性脓肿 ②开放性脓肿 ③胸，腹水 ④大面积烧伤的创伤分泌物 ⑤瘘管 ①封闭性脓肿： 在病灶局部外表消毒后，以 无菌注射器抽取脓液5-10ml 置无菌试管中送检。若怀疑 厌氧菌感染时，抽取脓液后 立即排尽注射器内的空气， 刺入无菌橡皮塞中送检。 ②开放性脓肿： 先消毒病灶周围，用无菌生 理盐水或70%的酒精擦去表 面渗出物，然后用无菌棉签 采取病灶深部脓液及分泌 物，置无菌试管中送检。 （采集两个拭子，一个做革兰染色，一个做分离培养） ③胸，腹水： 由临床医生无菌采集胸腔或腹 腔积液5-10ml，置无菌试管中 送检。（一般应先在无菌试管 中加入灭菌肝素0.5mg,防止标 本凝固） ④大面积烧伤的创伤分泌物： 应在多部位用无菌棉签采集标本，放入无菌试管中，注明部位送检。 ⑤瘘管： a、可用无菌操作采取边缘的肉芽组织 b、用无菌棉签挤压瘘管，选取有特 征性的，如“硫磺颗粒”送检 c、也可将灭菌纱布塞入瘘管中，次 日取出送检 标本采集注意事项： ①采集标本时应注意观察脓汁及分泌物的性状，色泽及气味，为培养和鉴定提供参考依据。 如：a、呈绿色，可能提示有铜绿假单胞菌感染 b、有恶臭味可能有厌氧菌感染 c、呈黄色，稠厚但没有臭味可能为葡萄 球菌感染 d、有“硫磺颗粒”提示有放线菌感染 ② 如做厌氧培养，应用厌氧运送系统运送。 标本在2小时以内到达实验室。 2.检验程序 五、试验内容 1.革兰染色 2.分离培养 血平皿及麦康凯平皿 * * 需氧培养 BA 、 Mac 厌氧培养 脓液、创伤分泌物及穿刺液 涂片 革兰染色 抗酸染色 初步报告 隔绝氧气运送 厌氧琼脂平板 菌落观察 涂片、染色 纯培养 生化反应、药敏试验 最终报告