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3.结果分析与评价 下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中,错误的是( ) A.可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到DNA和蛋白质 B.用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA,可去除部分杂质 C.透析法分离蛋白质的依据是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 D.进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法、电泳法等 解析 猪的红细胞中没有细胞核,只能用于蛋白质的提取和分离实验中;DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,低浓度和高浓度都可使DNA溶解,但在0.14 mol/L的NaCl溶液中,溶解度最小,可析出DNA,从而去除部分杂质;透析法分离蛋白质的依据是蛋白质是大分子物质,不能通过半透膜,从而去除样品中分子量较小的杂质。 答案 A (双选)红细胞中含有大量的血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列关于血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是( ) A.血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行 B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 C.粗分离中透析的目的是去除相对分子质量较大的杂质 D.可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 【答案】BC 【解析】蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时,首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后,配制成凝胶悬浮液,而不是用生理盐水;最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 1.几种物质的提取方法、原理及步骤 植物有效成分的提取 提取物质 提取方法 提取原理 步 骤 血红蛋白 凝胶色 谱法、 电泳法 ①根据相对分子质量的大小; ②各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同 ①样品处理 ②粗提取 ③纯化 ④纯度鉴定 玫瑰精油 水蒸气 蒸馏法 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 ①水蒸气蒸馏 ②分离油层 ③除水、过滤 提取物质 提取方法 提取原理 步 骤 橘皮精油 压榨法 通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油 ①石灰水浸泡、漂洗;②压榨、过滤、静置; ③再次过滤 胡萝卜素 萃取法 使提取物溶解在有机溶剂中,蒸发后得到提取物 ①粉碎、干燥 ②萃取、过滤 ③浓缩 不同物质的提取是根据其理化性质的不同来进行的,因此在提取物质时,应先确定该物质的理化性质,然后再选择适宜的提取方法进行提取。 水蒸汽蒸馏对于柑橘和柠檬等原料不适用。因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解。 3.用层析法鉴定时应注意的问题 (1)选择干净的滤纸,为防止操作时滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以戴手套进行操作。 (2)点样时应注意点样斑点不能太大(直径应小于 0.5 cm),如果用吹风机吹干,温度不宜过高,否则斑点会变黄。 (3)将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时注意滤纸两边不能互相接触,以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,使溶剂前沿不齐,影响结果。 许多植物含有天然香料,如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答下列问题: (1)薄荷油是挥发性物质。提取薄荷油时应选用________(填“鲜”或“干”)薄荷叶做原料,其原因是_______ ______________________________________________。 (2)用萃取法提取薄荷油时,采用的溶剂是______,原理是________________________________________。 (3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是________________。常用于分离油层和水层的器皿是______________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是________,除去固体硫酸钠的常用方法是________。 解析 本题考查植物芳香油的提取,同时考查识记和理解能力及解决实际问题的能力。(2)用萃取法提取薄荷油时,采用的溶剂是酒精,利用的原理是芳香油易溶于有机溶剂。(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠,可以使薄荷油与水出现明显的分层,然后用分液漏斗将这两层分开。在分离出的油层中加入无水硫酸钠,可以将其中的水分去除,放置过夜,再通过过滤除去固体硫酸钠,就可以得到薄荷油。 答案 (1)鲜 薄荷油是挥发性物质,鲜薄荷叶才含薄荷油 (2)酒精 薄荷油易溶于有机溶剂酒精中 (3)使油水混合物分层 分液漏斗 除水 过滤法 生物组织中有机物的提取方法有很多种。例如:凝胶色谱法、电泳法、蒸馏法
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