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(3)E过程中若要获得大量的卵母细胞需用 激素处理成年母猪。受体卵母细胞去核及选用MⅡ中期的原因是 。 (4)上述过程涉及的现代生物工程技术,属于细胞水平的是 。 (5)经过培养得到早期胚胎后可以用 技术以获得更多基因型相同的转基因克隆猪,由于 ? ,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。 【押题理由】 1.考情分析: 纵观近五年新课标全国卷,“基因工程与细胞工程”每年必考,如2014年卷ⅠT40、卷ⅡT40,2013年卷ⅠT40,2012年T40等。所占分值一般为15分,主要为非选择题。 2.命题角度: 基因工程的步骤、原理、应用,体细胞核移植的流程、原理、优点,转基因克隆猪培育的技术手段等。 3.难度:中等偏上。 4.押题指数:★★★★★ 【答题必备】 1.降低转基因动物免疫排斥反应的关键:抑制或除去抗原决定基因。 2.细胞核移入去核卵母细胞培养的理由: (1)营养丰富。 (2)体积大,易操作。 (3)含有刺激细胞核恢复分裂能力的物质。 【自我评卷】 本题共15分,除第(3)小题第一空1分外,其他每空2分。 你的得分是: 分。 【答案解析】 【解析】(1)降低免疫排斥反应的实质是对抗原的处理,故采用将供体基因组导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达或除去抗原决定基因,降低免疫排斥反应。 (2)目的基因导入受体细胞常用三种方法:(植物)农杆菌转化法;(动物)显微注射法;(微生物)感受态细胞法。因受体细胞为成纤维细胞,故用显微注射法。DNA分子杂交技术是检测目的DNA是否插入受体细胞染色体DNA中,属于目的基因的检测与鉴定步骤。 (3)促性腺激素作用于卵巢,促进超数排卵。受体细胞去核保证目的基因的表达,从而使核移植的胚胎遗传物质全部来自有价值的供体细胞;MⅡ中期的卵母细胞具有受精能力,并且可以激发细胞分裂、分化形成重组胚胎。 (4)转基因克隆猪的培育运用了基因工程、动物细胞培养、体细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等生物技术,属于细胞水平的是动物细胞培养、体细胞核移植。 (5)为获得更多基因型相同的转基因克隆猪,可采用胚胎分割技术。受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这是胚胎移植的生理基础之一。 答案:(1)导入某种调节因子 (2)显微注射法 目的基因是否已插入猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上 (3)促性腺 保证核移植的胚胎遗传物质全部来自有价值的供体细胞;具有受精能力,激发细胞分裂、分化形成重组胚胎 (4)动物细胞培养、体细胞核移植 (5)胚胎分割 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 三、细胞工程 1.植物细胞工程: (1)植物细胞工程理论基础:___________。 (2)植物组织培养过程中,细胞发生:_______________。 (3)植物体细胞杂交克服的障碍:_______________。 细胞全能性 脱分化、再分化 远缘杂交不亲和 2.动物细胞工程: (1)动物细胞工程常用的技术手段有_____________、_______ ___________、_____________、生产单克隆抗体等。 (2)动物细胞培养过程中,使组织细胞分散开使用的酶是 _____________________。 (3)动物细胞培养过程中使用的培养基是___________。 (4)动物细胞融合原理:_______________。 融合方法:_____________________、电激等。 (5)单克隆抗体优点:可大量制备、_________、灵敏度高。 动物细胞培养 动物体 细胞核移植 动物细胞融合 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 液体培养基 细胞膜的流动性 聚乙二醇、灭活的病毒 特异性强 (6)辨析单克隆抗体制备中的两次筛选。 ①第一次筛选要得到的是融合的杂种细胞。( ) ②第二次筛选出的是能产生特定抗体的杂交瘤细胞。( ) √ √ 高频考点一 基因工程 1.(2014·景德镇二模)下图是“万能细胞”的诞生过程(图中来自胚胎干细胞的OCT4、SOX2、NANOG和LIN28等基因决定细胞“全能性”)。请据图回答下列问题: (1)该研究过程用到了 、 ? 等现代生物技术手段。 (2)图中由皮肤细胞到“万能细胞”的“改造”类似于植物组织培养技术中的 过程。 (3)图中病毒的作用是 。为方便筛选,在重组病毒中除了插入的目的基因外,还应有 基因。 【审题·解题·答题】 1.(关键) 皮肤细胞到“万能细胞”的“改造”重点在于细胞的变化
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