高中生物课件选修3专题1基因工程.pptVIP

(4)反转录是指以RNA为模板在逆转录酶的作用下合成DNA的过程,可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(聚合酶链式反应)。 (5)基因工程中可以作为载体的除质粒外,还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (6)大肠杆菌细胞有细胞壁和细胞膜,能阻止质粒(外源DNA)等物质的进入,只能通过Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)才能作为受体细胞。 答案:(1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)E·coli T4 (4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR (5)λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 3.(2012·江苏高考)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题: (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_____　　　　　　　　　连接。 (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是　　　　__________末端,其产物长度为　　　　　　　　　　　　。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有　　　　种不同长度的DNA片段。 (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是　　　　。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加　　　　_____的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是_______ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 【解题指南】解答本题时要注意以下三点: (1)正确判断碱基、磷酸、脱氧核糖之间的关系。 (2)准确识别各种限制酶的切割位点。 (3)重组质粒中最少含有一种抗性基因。 【解析】(1)两条脱氧核苷酸链之间的碱基通过氢键相连,一条 脱氧核苷酸链中相邻的碱基通过脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖连接。 (2)根据限制酶SmaⅠ识别的碱基序列可知,限制酶SmaⅠ切割产 生的末端为平末端。在图1序列中共有2个SmaⅠ的切割位点,切 割后形成3种不同长度的产物,分别为537 bp、790 bp、661 bp。 (3)图1中有SmaⅠ的两个识别序列,完全切割后产生3个不同长度的DNA片段,若虚框中的碱基被T-A替换,则产生2个DNA片段,其中1个DNA片段与上次切割的相同,因此经完全切割后共产生 4种不同长度的DNA片段。 (4)切割目的基因可选用限制酶BamHⅠ和限制酶MboⅠ,但限制酶MboⅠ可将质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因都破坏,而限制酶BamHⅠ只破坏抗生素A抗性基因,因此只能选用限制酶BamHⅠ;重组质粒中含有抗生素B抗性基因,因此可在含抗生素B的培养基上培养。 答案:(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖 (2)平　537 bp、790 bp、661 bp (3)4 (4)BamHⅠ　抗生素B　同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接 4.(2013·西安模拟)某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示,请回答下列问题: (1)从基因文库中获得的抗盐基因可用　　　　技术进行扩增。将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状的产生所依据的原理是　　　　　　　　　。 (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能_________ 　　　　　　,也不能　　　　　　　　　。 (3)在构建重组质粒时,应选用　　　　　　　　两种酶对　　　　　　　_______________________________进行切割,以保证重组DNA序列的惟一性。 (4)为了确定抗盐烟草培育成功,既要用放射性同位素标记的　　　　　　　_____________________作探针进行分子杂交检测,又要用　　　　　　　　_____________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的 耐盐性。 【解析】(1)从基因文库中获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增。依据基因重组的原理将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状