耐辐射奇球菌dps-2蛋白的互作蛋白筛选-screening of interacting proteins of dps - 2 protein from deinococcus radiodurans.docxVIP

I I 南华大学学位论文原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包 含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的 学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论 文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名： 年 月 日 南华大学学位论文版权使用授权书 本学位论文是本人在南华大学攻读 硕 （博/硕）士学位期间在导师指导下 完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以 其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即： 学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的 全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国 家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士 学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》 规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中 国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学 位论文，解密后适用该授权。 作者签名： 导师签名： 年 月 日 年 月 日 II II 项目资助 本研究受到 国家自然科学基金项目（批准号 湖南省自然科学基金重点项目（批准号：06JJ2023） 资助 This work was suported by National Nature Science Fundation of China (Grant No., and a key project from Nature Science Fundation of Hunan Province (Grant No. 06JJ2023) III III 目 录 主要英文缩略词1 中文摘要2 英文摘要3 1 引言5 2 材料与方法14 2.1 材料与试剂14 2.2 实验方法19 3 结果30 HYPERLINK \l _TOC_250002 3.1 DR 菌基因组 DNA 的制备 30 3.2 pGBKT7-dps 和 pGADT7-dps 的构建 30 HYPERLINK \l _TOC_250001 3.3 利用酵母双杂交筛选 Dps-2 蛋白的相互作用蛋白 34 3.4 测序及生物信息学分析37 4 讨论39 HYPERLINK \l _TOC_250000 4.1 耐辐射奇球菌 Dps 蛋白的研究 39 4.2 酵母双杂交系统的局限及解决方案41 4.3 阳性克隆的基因分析42 5 结论47 参考文献48 文献综述52 成果目录65 致谢66 PAGE PAGE 10 主要英文缩略词 缩略语 英文全称 中文译名 AD activation domain 激活域 Ade Adenine 腺嘌呤 Amp ampicillin 氨苄青霉素 BD binding domain 结合域 CAT Catalase 过氧化氢酶 cfu Colony Forming Units HYPERLINK /view/1941756.htm 菌落形成单位 CTAB cetrimonium bromide 十六烷基三甲基溴化铵 DMSO dimethylformadine 二甲基亚砜 DMF Dimethylformadie 二甲基甲酰胺 DO dropout supplement 省却成分添加剂 DR Deinococcus radiodurans 耐辐射奇球菌 Dps DNA protection during starvation 逆境 DNA 保护蛋白 DSBs double-strand DNA breaks 双链断裂 Gy Gray 戈瑞 His histidine 组氨酸 Kan Kanamycin 卡那霉素 Leu Leucine 亮氨酸 ORF open reading frame 开放阅读框 SD base synthetic dropout minimal base 人工合成缺陷型极限培养基 SD-X SD media lacking X “X”成分缺陷型 SD SOD Superoxide dismutase 超氧化物歧化酶 Trp Tryptophan 色氨酸 UAS upstream activating sequence 上游激活序列 X-DO X-DO Supplement “X”成分缺陷型添加剂 X-gal 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D- Galactoside