三氧化二砷经ros nf-κb bcl-2及bax途径诱导hl-60细胞凋亡的信号传导途径研究-study on signal transduction pathway of arsenic trioxide inducing hl - 60 cell apoptosis via ros nf - κ b bcl - 2 and bax pathway.docxVIP

下载本文档

31
0
约4.26万字
约 49页
2018-07-29 发布于上海
举报
版权申诉

三氧化二砷经ros nf-κb bcl-2及bax途径诱导hl-60细胞凋亡的信号传导途径研究-study on signal transduction pathway of arsenic trioxide inducing hl - 60 cell apoptosis via ros nf - κ b bcl - 2 and bax pathway.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

三氧化二砷经ros nf-κb bcl-2及bax途径诱导hl-60细胞凋亡的信号传导途径研究-study on signal transduction pathway of arsenic trioxide inducing hl - 60 cell apoptosis via ros nf - κ b bcl - 2 and bax pathway

三氧化二砷经ROS、NF-κB、Bcl-2及Bax途径诱导HL-60细胞凋亡的信号传导途径研究摘要目的：探讨三氧化二砷（arsenictrioxide,As2O3）对HL-60细胞活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）生成、NF-κB及其靶基因C-IAP2和bcl-2、bax表达的作用，同时观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)对上述指标变化的影响。方法：7.5μmol/LAs2O3单用及与500μmol/LNAC联合分别作用于HL-60细胞12h和24h后，流式细胞术检测HL-60细胞ROS的产生量；Westernblot法分别检测核蛋白NF-κBp65、bcl-2和bax变化情况；RT-PCR法检测bcl-2、bax以及NF-κB靶基因C-IAP2的表达；免疫组织化学法检测bcl-2蛋白；瑞氏染色观察不同浓度As2O3对正常人外周血淋巴细胞生长的影响。结果：①7.5μmol/L的As2O3分别作用于HL-60细胞12h、24h后，细胞内ROS的生成量增加，与对照组比较，有显著性差异（P＜0.05）；500μmol/LNAC和7.5μmol/LAs2O3共同作用HL-60细胞12h、24h，细胞内ROS的生成降低，与对应的As2O3处理12h、24h组相比，有显著性差异（P＜0.05）。②Westernblot法检测结果显示：7.5μmol/LAs2O3作用HL-60细胞12h、24h后，NF-κBp65蛋白相对表达量分别为(45.66±4.56)%和(27.68±2.36)%，bcl-2蛋白相对表达量分别为(56.34±6.45)%和(42.01±3.01)%，bax蛋白相对表达量分别(50.65±4.50)%和(66.78±5.05)%，与对照组相比有显著性差异（P＜0.05）。③500μmol/LNAC和7.5μmol/LAs2O3共同作用HL-60细胞12h、24h后，NF-κBp65蛋白相对表达量分别为(60.18±4.93)%和(45.35±4.27)%，与相应的As2O312h、24h单独处理组相比，有显著性差异（P＜0.05）；bcl-2蛋白相对表达量分别为(54.77±5.97)%和(41.71±4.13)%，bax蛋白相对表达量分别为(54.49±4.93)%和(66.70±5.10)%，与相应的As2O312h、24h单独处理组相比，均无显著性差异（P＞0.05）；免疫组织化学法检测bcl-2也显示相同的结果。④7.5μmol/LAs2O3作用HL-60细胞12h、24h，C-IAP2mRNA相对表达值分别为(68.48±4.79)%和(55.21±3.92)%；bcl-2mRNA相对表达值分别为(65.02±4.69)%和(40.70±3.94)%，baxmRNA相对表达值分别为(46.71±4.26)%和(95.65±5.57)%，与对照组相比有显著性差异（P＜0.05）。⑤500μmol/LNAC和7.5μmol/LAs2O3共同作用HL-60细胞12h、24h后，C-IAP2mRNA相对表达值分别为(82.86±6.16)%和(85.38±6.78)%；分别与相应的As2O312h、24h单独处理组相比，有显著性差异（P＜0.05）；bcl-2mRNA相对表达值分别为(64.81±4.80)%和(37.21±3.42)%，baxmRNA相对表达值分别为(46.80±4.04)%和(94.41±5.71)%，与相应的As2O312h、24h单独处理组相比，无显著性差异（P＞0.05）。⑥7.5μmol/LAs2O3对正常人外周血淋巴细胞影响不大。结论：①≤7.5μmol/LAs2O3对正常淋巴细胞不具有明显的凋亡诱导作用。②As2O3能诱导HL-60细胞ROS产生，下调NF-κBp65蛋白及其靶基因C-IAP2的表达，且这种效应能被NAC所阻断。③bcl-2和bax在HL-60细胞均有表达，As2O3能下调bcl-2基因和上调bax基因的表达，且不能为NAC所阻断。④经ROS介导下调NF-κB及其靶基因C-IAP2的表达可能是As2O3诱导HL-60细胞凋亡的信号传导途径之一。关键词：三氧化二砷；HL-60细胞；活性氧（ROS）；NF-κB；C-IAP2；bcl-2；baxThestudyofthesignaltransductionoftheapoptosisofHL-60cellsinducedbyArsenictrioxideviaROS,NF-κB,Bcl-2andBaxAbstractObjective:Toinvestigatethealterationsofreactiveoxygenspecies(ROS)levelandexpres