基础医学微生物感染的病原学检查法ppt课件.pptVIP

血清学诊断：检测抗体 用已知细菌或其Ag检测相应的Ab及量的多少，作为某些病原菌感染的辅助诊断 急性期和恢复期双份血清，恢复期效价升高≥4倍有诊断价值 局限 难以早期诊断 当抗体水平升高，很难找出抗体效价与病情间关系 方法：玻片或试管凝集试验、沉淀试验、补体结合试验和冷凝集试验 细菌感染的实验诊断方法 病毒感染的实验室诊断方法 形态学检查 分离培养 病毒在细胞中增殖的鉴定指标 病毒成分的检测 病毒抗体的检测 形态学检查 电子显微镜（electromicroscopy，EM） 免疫电镜法 immunoelectromicroscopy，IEM 光学显微镜 包涵体（inclusion body） 内基小体（Negri body） 病毒的分离培养 动物接种 鸡胚培养：9~14日鸡胚 组织培养 器官培养　　组织培养　　细胞培养 细胞培养 培养细胞的类型 原代细胞　Primary cell culture 体外分裂2~3代 二倍体细胞　Diploid cell 保持二倍染色体，50~100代，用于病毒疫苗生产 传代细胞 体外无限分裂的细胞，多是肿瘤细胞 易于传代，多数病毒敏感，但不能用于制备疫苗，且可能有内源性病毒 病毒在细胞增殖的鉴定指标 细胞病变效应（cytopathic effect，CPE） 红细胞吸附（hemadsorption） 红细胞凝集（hemagglutination） 病毒干扰作用（viral interference） 中和试验（neutralization test，NT） 细胞病变效应（CPE） 病毒的定量 TCID50 病毒感染性和毒力的指标是50%组织细胞感染量（50% tissue culture infectious dose） PFU 空斑形成试验（plaque formation） 每毫升病毒悬液空斑形成单位（pfu/ml） 用于病毒浓度的精确定量 病毒的数量与感染性测定 蚀斑测定：准确滴定病毒感染性的方法 蚀斑（Plaque）， 每个蚀斑是由一个有感染性病毒颗粒形成，称为蚀斑形成单位（Plaque forming unit，PFU）。病毒的感染量用PFU/ml表示 50%感染量（ID50）或50%组织细胞感染量（TCID50） 不能准确地测定感染性病毒颗粒的数量 病毒成分的检测 病毒抗原的检测 目前常用的技术是荧光标记技术、酶标记技术（如enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）或放射免疫标记技术。 病毒核酸的检测 基因芯片（gene chip） DNA芯片（DNA chip）或cDNA微矩阵列（cDNA Microarray） 病毒抗体的检测 中和试验（neutralization test，NT） 血凝抑制试验（hemagglutination inhibition test，HI） 补体结合试验（complement fixation，CF） ELISA法 蛋白印迹技术（Western blot） ELISA for HIV antibody Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity * 腹腔热灌注化疗在腹膜假性黏液腺瘤治疗中应用肝功能异常时肠外营养中氨基酸的应用钢球磨煤机顶轴润滑油站系统讲解剖析高密隆运服务顾问和客服思想意识和基础汽车知识话术讲解流程培训高新技术企业与研发费加计扣除政策讲解苏州工业园区地方税务局 * Medical Microbiology Department of Microbiology, HMU 第一篇 微生物学基础 第8章 微生物感染的病原学检查法 微生物学教研室 谷鸿喜 提纲 细菌感染的微生物学检查法 　病原体检查 核酸的检测 抗原、抗体的检测 病毒感染的微生物学检查法 　电镜及免疫电镜 病毒的分离培养和鉴定 　核酸的检测 抗原、抗体的检测 真菌感染的微生物学检查法 　直接镜检 真菌的分离培养 病原学实验室诊断方法 形态学检查 光学显微镜　　电子显微镜 分离培养和鉴定 免疫学技术 抗原－抗体检测 分子生物学方法 病原体基因检测 标本的采集与送检原则 无菌操作 感染部位、病变部位采集标本 不同时间采集不同标本 尽量在使用抗生素前采集 检查特异性抗体，采急性期和恢复期双份血清 ≥4倍有诊断价值。血清标本应-20℃保存 及时送检 多数细菌标本应冷藏送检。脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌应注意保温，床旁接种 病毒4℃~-70℃保存 细菌感染的微生物学检查法 　细菌学诊断 　病原菌成分检测 　抗体的检测 细菌学诊断 示踪性检测 形态学检查 分离培养 生化试验 血清学鉴