神经生长因子对高胆红素血症新生大鼠脑组织fasfas-l表达的影响-effect of nerve growth factor on fasfas - l expression in brain tissue of neonatal rats with hyperbilirubinemia.docxVIP

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2018-07-31 发布于上海
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神经生长因子对高胆红素血症新生大鼠脑组织fasfas-l表达的影响-effect of nerve growth factor on fasfas - l expression in brain tissue of neonatal rats with hyperbilirubinemia

山西医科大学硕士学位论文山西医科大学硕士学位论文神经生长因子对高胆红素血症新生大鼠脑组织 Fas/Fas-L 表达的影响摘要目的：在新生儿时期有许多常见的病理状态，新生儿高胆红素血症（hyperbilirub- inemia of newborn）便是其中之一，严重时可并发胆红素脑病（bilirubin encephalo- Pathy）造成不可逆脑损伤（brain injury，BI）。因此本实验通过建立新生大鼠高胆红素血症模型，给予神经生长因子（nerve growth factor，NGF）的干预来观察其脑组织中 Fas /Fas-L 表达的变化，探讨高胆红素血症的发病机制及 NGF 对神经系统损伤的保护作用，进而为降低胆红素脑病的死亡率提供一定理论依据。方法：随机把 7 日龄 SD（Sprague-Dawley）大鼠共 120 只分为高胆红素血症模型组（A 组，n=40)，高胆红素血症+NGF 干预组（B 组，n=40)，正常对照组（C 组，n=40）。各实验组再根据造模结束后的时间不同分成 6h 组、12 h 组、24 h 组、48h 组、72h 组共 5 个亚组（n=8）。B 组大鼠立刻在造模后给予剂量为 50μg/KG/d 的 NGF 通过腹腔注射（1 次/d)，持续 3 天，最后将各实验组大鼠脑组织于不同时间点取出。用 HE 染色法和免疫组织化学法对 Fas/Fas-L 进行观察和测定，然后进行结果计算和统计学分析，最终得出结论。结果：（1）动物模型行为观察：A、B 两组大鼠在造模后均表现出行为异常，B 组给予 NGF 干预后各时间点症状较 A 组明显减轻，C 组无异常行为。（2）脑组织外观：造模后程度不同的水肿、萎缩甚至液化坏死出现于 A、B 两组大鼠的脑组织，B 组各时间点比 A 组程度减轻，C 组基本正常。（3）HE 染色：A、B 两组大鼠的脑组织出现 I II II 程度不同的神经细胞水肿、变性（于造模后 6h、12h），甚至坏死（于造模后 24h、48h），明显的神经元坏死、胶质细胞增生、核的固缩和碎裂出现在病灶中心（于造模后 72h）； B 组比 A 组程度减轻；C 组脑组织细胞基本正常。（4）Fas/Fas-L 的表达：A、B 两组大鼠脑组织 Fas/Fas-L 在造模后表达均升高，在 B 组的表达各时间点均低于 A 组高于 C 组，统计学差异有明显意义（P＜0.05），Fas/Fas-L 在 C 组大鼠脑组织各时间点中表达少量或不表达，各时间点组内比较差异无明显统计学意义（P＞0.05）。结论：（1）大鼠行为能力出现改变在造模后，证实高胆红素血症模型制作成功；（2）造模后不同程度的水肿、萎缩及液化坏死出现在脑组织中，该程度减轻在 NGF 干预后，从病理学视角验证了高胆红素血症所致的神经损伤可通过 NGF 治疗后减轻； (3)NGF 可能通过下调 Fas/Fas-L 的表达从而减轻脑组织损伤过程，其中接受干预 48～ 72h 时效果最明显。关键词：神经生长因子；高胆红素血症；脑损伤；Fas /Fas-L；凋亡 PAGE PAGE III Effect of NGF on Fas and Fas-Ligand expression in brain tissue of neonatal rats with hyperbilirubinemia Abstract Objective： Hyperbilirubinemia of newborn is one of the common pathological states of the neonatal period, severe cases can be complicated with bilirubin encephalopathy, even irreversible brain injury(BI). This experiment has set up the high bilirubin newborn rat model, to observe the change of Fas/Fas-L of brain tissue after the modules ware made the nerve growth factor(NGF), to explore the pathogenesis of high bilirubin blood disease and possible mechanisms of cerebral protective effect of NGF, to provide a theoretical basis for clinical drug