肾透明细胞癌3p21.3区抑癌基因与肾组织特异性htert抑制因子的初步筛选研究-preliminary screening of tumor suppressor genes and renal tissue specific htert inhibitor in 3p21.3 region of renal clear cell carcinoma.docxVIP

独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究 成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□ ，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 中文摘要1 HYPERLINK \l _bookmark1 Abstract 4 HYPERLINK \l _bookmark2 英文缩写一览表8 HYPERLINK \l _bookmark3 正文 HYPERLINK \l _bookmark3 肾透明细胞癌 3p21.3 区抑癌基因与肾组织特异性 hTERT 抑制因子的初步 HYPERLINK \l _bookmark3 筛选研究 10 HYPERLINK \l _bookmark3 前 言10 HYPERLINK \l _bookmark4 第一部分 hTERT 基因在肾透明细胞癌组织及细胞株中的表达研究 13 HYPERLINK \l _bookmark4 材料13 HYPERLINK \l _bookmark5 方法14 HYPERLINK \l _bookmark6 结果16 HYPERLINK \l _bookmark7 讨论19 HYPERLINK \l _bookmark8 第二部分 3p21.3 区候选基因在肾透明细胞癌组织与正常肾组织中的表达差异研 HYPERLINK \l _bookmark8 究 22 HYPERLINK \l _bookmark8 材料22 HYPERLINK \l _bookmark9 方法24 HYPERLINK \l _bookmark10 结果26 HYPERLINK \l _bookmark11 讨论32 HYPERLINK \l _bookmark12 总 结37 HYPERLINK \l _bookmark13 参考文献38 HYPERLINK \l _bookmark14 综 述45 HYPERLINK \l _bookmark15 参考文献51 HYPERLINK \l _bookmark16 附录54 HYPERLINK \l _bookmark16 致 谢55 华中 科技 大 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 肾透明细胞癌 3p21.3 区抑癌基因与肾组织特异性 hTERT 抑制因子的初步筛选研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科 硕士研究生：向威 导 师：赵军 教 授 陈朝晖 副教授 中文摘要 目的：检测 hTERT 及 6 个候选基因在肾透明细胞癌与正常肾组织中的表达 水平，筛选位于人 3 号染色体短臂（3p21.3）上潜在的肾组织特异性 hTERT 抑 制因子和/或肾透明细胞癌抑癌基因。 方法：1. 参考文献报道并结合生物信息学分析方法，从3p21.3区筛选出6 个候选基因（LRRC2、SETD2、ALS2CL、APEH、SEMA3B、SLC38A3）为研 究对象；收集人肾透明细胞癌手术病例标本（26例），提取总RNA，利用RT-PCR 技术及quantitative real-time PCR (QPCR)技术检测hTERT与各候选基因在肾透明 细胞癌与配对正常肾组织标本中的表达。 2. 综合RT-PCR与实时定量PCR两种检测方法选出可能的抑癌候选 基因，行免疫组织化学染色及Western Blot蛋白检测，进一步验证其表达水平的 差异。 结果：1. 以正常肾组织作为对照，RT-PCR示 hTERT基因在69.23%(18/26) 肾透明细胞癌组织中表达阳性，两株肾透明细胞癌细胞株786/O与SN12亦为阳性 表达; QPCR示hTERT基因mRNA的相对表达量为0.070～9.640，中位数4.192，与 正常肾组织相较，其中76.92%（20/26）的肾透明细胞癌组织标本中hTERT基因 相对表达量显著上调，p0.05