生物絮团对草鱼和鳙肠道细菌群落结构影响分析-effect of biological flocs on intestinal bacterial community structure of grass carp and bighead carp.docxVIP

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2018-08-01 发布于上海
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生物絮团对草鱼和鳙肠道细菌群落结构影响分析-effect of biological flocs on intestinal bacterial community structure of grass carp and bighead carp.docx

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粉为碳源培养的生物絮团（TSS维持在100mg/l），每天按常规饲料添加量（体重的3%）的80%投喂基础饲料；第二组添加以葡萄糖为碳源培养的生物絮团（TSS维持在100mg/l），每天按常规饲料添加量（体重的3%）的80%投喂基础饲料；第三组为对照组，每天按体重的3%投喂基础饲料。养殖8周后，应用PCR-DGGE技术分析这三组草鱼肠道微生物菌群分布。DGGE指纹图谱分析显示：与对照组相比，生物絮团组草鱼肠道菌群多样性提高，淀粉生物絮团组与葡糖生物絮团组草鱼肠道细菌相似性约为50%，而普通饲料组草鱼肠道细菌与生物絮团组草鱼肠道细菌相似性仅在20%-40%之间，说明生物絮团的应用对草鱼肠道菌群结构及多样性有较大改变，而碳源的类型对肠道微生物菌群结构的影响较小。对16个特征条带的测序结果分析显示：这些特征条带归属于变形菌门（Proteobacteria）的α、γ亚群、绿弯菌纲（Chloroflexi）和不可培养细菌（unculturedbacterium）。特异条带分析发现，生物絮团组草鱼肠道特异菌群为两类纤维素酶产生菌Enterobacter及Aeromonas，进一步与不同培养阶段时生物絮团的细菌群落结构的比较分析，发现生物絮团组草鱼肠道存在着慢生根瘤菌科、红杆菌属的细菌等共有细菌，结果可见生物絮团影响了草鱼肠道菌群的变化。3、生物絮团对鳙肠道菌群影响2010年7-10月在广东省中山食品水产进出口集团有限公司养殖基地进行，将鳙（15.1±0.8g）分别养殖于生物絮团组（TSS维持在100mg/l）、施肥组（添加尿素7g（N46%）和过磷酸钙3g（P2O516%），维持养殖水体浮游动物量8-10ind/l）和池塘网箱养殖组（网箱（3m×3m）悬挂于草鱼养殖池塘上层水（1m），维持网箱水体浮游动物量为3-5ind/l）。8周后，应用PCR-DGGE技术分析这三种养殖模式鳙肠道微生物菌群分布。DGGE指纹图谱分析显示：生物絮团组鳙肠道菌群多样性最高，网箱养殖组鳙肠道菌群多样性最低。对10个特征性条带克隆测序结果显示：葡糖醋杆菌属（Gluconacetobacter）、葡萄球菌属（Staphylococcus）、绿弯菌属（Chloroflexi）及某未知菌属为生物絮团组鳙肠道特异性条带所代表的细菌，施肥组和池塘网箱养殖组鳙肠道特异条带代表的细菌包括气单胞菌属（Aeromonas）、梭菌属（Clostridium）及某未知菌属。生物絮团的应用降低了鳙肠道Aeromonas分布量，从而降低了鳙因这类细菌大量存在而致病的风险。总之，生物絮团整个培养过程中，变形菌在数量上占主导地位，放线菌次之，芽孢杆菌和拟杆菌数量很少，其中α-变形菌属是整个形成过程中特优势种类。生物絮团增强了养殖草鱼及鳙肠道微生物菌群组成多样性，使草鱼肠道纤维素酶产生菌分布量增加，同时降低了气单胞菌在鳙肠道的分布，可能会降低鳙因这类细菌大量存在而致病的风险。关键词：生物絮团，PCR-DGGE，肠道细菌，草鱼，鳙Theeffectsofbio-flocontheintestinalbacterialcommunitystructureofgrasscarp(Ctenopharyngodonidellus)andbigheadcarp(Aristichthysnobilis)ABSTRACTBio-flocwasakindofreunionmaterialformedbybiologicalflocculationoforganismsandinorganicinwhichthemajorcomponentwereaerobicmicroorganismsinaquaculturewater.Thecoreoftheflocwerebacterialflocandfilamentousbacteria,andthenattachedbymicrobialextracellularproducts(extracellularpolymers),intracellularproducts(poly-β-hydroxybutyrate),polyphosphates,polysaccharides,divalentcation,andsoon.Heterotrophicbacteria,denitrifyingbacteria,denitrificationbacteria,algae,fungi,protozoaandotherorganismstogetherconstitutedthebio-floc.Bio-flocplayedanimportantroleinthepurificationofaquaculturewateranddietsofbreedinganimals.