基于一步法萃取婴幼儿奶粉中游离态叶黄素和β―胡萝卜素研究.docVIP

基于一步法萃取婴幼儿奶粉中游离态叶黄素和β―胡萝卜素研究 　　摘 要 为建立简单、快速、准确的样品前处理方法以提高婴幼儿奶粉中叶黄素和β-胡萝卜素的提取效率，通过显微镜观察奶粉样品中叶黄素包埋剂的溶解特性，采用有机溶剂一步萃取的方式替代传统耗时的皂化法.样品加水破除包埋剂，后续经乙醇溶解剩余被脂类成分包裹的包埋剂并沉淀蛋白，再用甲基叔丁基醚在单相中一步萃取叶黄素和β-胡萝卜素，方法无需浓缩，适用于高效液相色谱直接分析.结果表明，游离态叶黄素和β-胡萝卜素的线性相关系数均为0.999 9，加标回收率为91%～94%，且所有RSD5%. 　　关键词 叶黄素；β-胡萝卜素；婴幼儿奶粉；样品前处理；一步萃取 　　中图分类号 R155 文献标识码 A 文章编号 1000-2537（2017）03-0053-05 　　One-Step Extraction of Free Lutein and β-Carotene from Infant Formula 　　GUO Yuan， ZENG Xing-xing， LIU Xue-mei， SHEN Yao*， CHEN Bo 　　（Key Laboratory of Phytochemical RD of Hunan Province， Hunan Normal University， Changsha 410081， China） 　　Abstract We report， in this work， the establishment of a simple， rapid and accurate sample pretreatment method to improve the extraction efficiency of lutein and β-carotene in infant milk powder. To replace the time-consuming saponification method， dynamic dissolution processes of different solvents for embedding materials of lutein and simultaneous extraction of lutein and β-carotene by organic solvents were inspected using a microscope. Using water to dissolve the embedding material to free lutein and β-carotene and ethanol to precipitate proteins， we show that the sample can be extracted by methyl tert-butyl ether in monophase. After that， the extraction solution could be analyzed by HPLC without concentration. The calibration curve of free lutein and β-carotene exhibited good linearity， with both r2 equal to 0.999 9. Recoveries ranged from 91% to 94%， and relative standard deviations （RSDs） are less than 5%. 　　Key words lutein； β-carotene； infant formula； sample pretreatment； one-step extraction 　　?胡萝卜素具有延缓衰老、调节免疫、抗突变、预防癌症等多种生理功能[1-2]，其中，天然叶黄素是优良的抗氧化剂，具有预防老年性黄斑区病变、预防白内障等独特功能[3].β-胡萝卜素是维生素A的重要来源，具有抗氧化以及增强免疫力等作用[4-5].叶黄素和β-胡萝卜素已经作为食品添加剂和营养增补剂广泛用于食品加工.2012年3月颁布的《食品营养强化剂使用标准》批准了叶黄素（万寿菊来源）可用于婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品中，其添加量分别为300～2 000 μg/kg，1 620～4 230 μg/kg[6]. 　　叶黄素和β-胡萝卜素均为含有多个异戊二烯单位的四萜化合物，对光、热、氧敏感，极易发生结构异构化.因此，叶黄素和β-胡萝卜素一般以其包埋体的方式添加到实际样品中[5].叶黄素和β-胡萝卜素的提取工艺一般为有机溶剂提取法、酶反应提取法、