1295.龙须菜活性多糖提取、分离纯化、结构及其活性的研究.docVIP

学位论文 题 目： 龙须菜活性多糖提取、 分离纯化、结构及其活性的研究 英文题目： Isolation and characterization of soluble activity polysaccharide from the red seaweed Gracilaria lemaneiformis (gracilaria, Rhodophyta) 专 业： 食品科学 研究方向： 食品生物技术 姓 名： 指导教师： 教授 二OO八年五月二十日 目 录 摘要 I III 第一章 引言 1 1.1龙须菜的研究概况 2 1.1.1龙须菜概况 1 1.1.2龙须菜的营养成分 1 1.1.3龙须菜的药理活性 2 1.2海藻多糖的生物活性研究 2 1.2.1抗肿瘤作用 2 1.2.2抗心血管疾病作用 3 1.2.3抗病毒作用 4 1.2.4抗氧化作用 5 1.2.5 抗辐射作用 5 1.2.6抗突变作用 6 1.2.7 护肤润肤功能 6 1.2.8增强免疫力作用 6 1.3 海藻多糖的构效关系 7 1.3.1 多糖的组成和糖苷键的关系 7 1.3.2 多糖中的硫酸根离子与多糖功能的关系 8 1.3.3多糖的高级结构与多糖功能的关系 8 1.4海藻多糖应用前景和研究趋势 9 1.4.1 海藻多糖的应用前景 9 1.4.2 海藻多糖的研究趋势 9 1.5本研究的内容和预期目标 10 1.5.1研究内容 10 1.5.2预期目标 10 第二章 分离龙须菜活性多糖的方法研究 11 2.1 材料与方法 11 2.1.1试验材料和前处理 11 2.1.2试剂和仪器 11 2.1.3活性多糖的提取 12 2.1.4 实验方法 12 2.1.4.1 粗多糖溶出率测定 12 2.1.4.2多糖含量测定 13 2.1.4.3 蛋白含量测定 13 2.1.4.4 硫酸基含量测定 14 2.1.4.5 3,6-内醚半乳糖和半乳糖含量测定 15 2.1.4.6 高效阴离子色谱法测定单糖组成 16 2.1.4.7 淋巴细胞免疫试验 17 2.1.4.8 抗病毒试验 17 2.1.5 数据处理 18 2.2 结果与分析 18 2.2.1 龙须菜粗多糖胶体和非胶体部分的溶出率、多糖含量、蛋白含量和免疫活性比较 18 2.2.2不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖的溶出率、蛋白含量和多糖含量的影响 18 2.2.3不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖的单糖组成和比例的影响 20 2.2.4不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖中的硫酸基、3,6-内醚半乳糖和半乳糖含量的影响 21 2.2.5不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖免疫活性和抗病毒活性的影响 22 2.3 讨论 24 2.4 小结 25 第三章 龙须菜多糖提取工艺优化及其活性的研究 26 3.1材料与方法 26 3.1.1 材料和前处理 26 3.1.2 试剂和仪器 26 3.1.3 活性多糖的提取 26 3.1.4 正交试验设计 27 3.1.5试验方法 27 3.1.6数据处理 27 3.2 结果与分析 27 3.2.1龙须菜非胶体多糖的提取工艺优化 27 3.2.2 验证实验 30 3.3 讨论 30 3.4 小结 30 第四章 龙须菜活性多糖的纯化及其活性研究 31 4.1 材料与方法 31 4.1.1试验材料和前处理 31 4.1.2 试剂和仪器 31 4.1.3活性多糖的提取 31 4.1.4非胶体粗多糖（NGF）的离子柱层析纯化 32 4.1.5多糖的纯度鉴定 32 4.1.6试验方法 32 4.1.7 数据处理 32 4.2 结果与分析 32 4.2.1龙须菜粗多糖的分离纯化 33 4.2.1.1 阴离子交换柱层析 33 4.2.1.2 NGFW和NGFS的得率、多糖和蛋白含量比较 33 4.2.1.3 NGFW和NGFS的免疫活性和抗病毒能力比较 34 4.2.1.4 NGFW和NGFS的单糖组成和比例 34 4.2.1.5 NGFW和NGFS硫酸基、3,6-内醚半乳糖和半乳糖含量比较 35 4.2.2 NGFS纯度鉴定 35 4.2.2.1 凝胶柱层析鉴定 36 4.3 讨论 36 4.4 小结 37 第五章 龙须菜活性均一多糖结构解析及其构效关系的研究 38 5.1 材料和方法 38 5.1.1 材料 38 5.1.2试剂和仪器 38 5.1.3 试验方法 38 5.1.3.1 3,6-内醚半乳糖和半乳糖含量测定 38 5.1.3.2 高效阴离子色谱法测定单糖组成 39 5.1.3.3 红外光谱（IR）分析 39 5.1.3.4 核磁共振（NMR）分析 39 5.2 结果与分析 39 5.2.1 NGFS的单糖组成 40 5.2.2 NGF