感染马立克氏病病毒鸡胸腺蛋白质组学研究胡序明ppt课件.pptVIP

乙方有义务提供相应的执业资格证、执业印章等配合甲方工程招投标、承担的工程项目报建及建设施工过程中各类手续办理。 感染马立克氏病病毒鸡胸腺蛋白质组学研究 胡序明，范忠军，郁川，钱琨，金文杰，秦爱建* 省部共建教育部禽类预防医学重点实验室，江苏省动物预防医学重点实验室，江苏 扬州 225009 2011年10月 中国 成都 MD Normal 马立克氏病病毒（Marek‘s disease virus ，MDV）是一种高度细胞结合性、 致肿瘤性α疱疹病毒，给养鸡业造成了巨 大经济损失。 马立克氏病（Marek’s disease ,MD）是一种淋巴 细胞增生性疾病，以免疫抑 制、神经性障碍、致瘤性T细 胞淋巴瘤等为特征。 一 研究背景、目的及意义 MDV体内感染主要分为四个阶段：MDV最初感染的靶细胞为B细胞，然后感染T细胞，最终形成T细胞淋巴瘤。 近年来人们通过新出现的蛋白质组学技术研究MDV感染后不同阶段鸡免疫器官（如脾脏和法氏囊）的蛋白表达的动态变化。 胸腺是禽类T细胞分化、发育和成熟的场所。MDV感染后引起T细胞免疫抑制并最终发展为T细胞淋巴瘤，其潜伏感染主要与活化的CD4+ T淋巴细胞有关。 MDV感染后胸腺内哪些蛋白发生了改变？这些蛋白的变化能为我们理解MDV致病机制和致瘤机理提供什么线索？ 二 材料与方法 1 材料 （1）1日龄SPF鸡（由北京梅里亚公司提供），并在扬州大学兽医学院的SPF隔离器中进行饲养。 （2）感染鸡用的RB1B强毒株（MDV）由本实验室保存 。 RB1B感染SPF鸡，实验组和对照组 胸腺2-DE样品制备 胸腺组织病变检测 蛋白样品的IEF和PAGE电泳分离 图像扫描和初步分析 胰酶对脱色后蛋白质的消化 质谱的多肽指纹图、微测序分析 质谱结果的生物信息学分析和比对 Real-time PCR和western blot实验的进一步验证 数据统计 蛋白信 息的初 步获得 有意义蛋白 质的发现 功能研究 分析 讨论 感兴趣 蛋白点 的切取 2 方法 对照组 感染组 7DPI 14DPI 21DPI 28DPI 35DPI 42DPI 图1.1 不同阶段攻毒组和对照组胸腺比较 图 1.2 两组间不同阶段 胸腺/体重 差异统计柱形图 1 MDV感染后不同阶段的病变情况 三 结果与讨论 图2.1 MDV感染后不同时间点差异蛋白点数比较 图2.2 胸腺2-DE图谱差异点（ 4 dpi对照组） 2 MDV感染后胸腺蛋白差异表达情况 在MDV感染后的七个阶段累计检测到250个差异蛋白点，这些差异蛋白点集中在21、28和35天。其中，上调蛋白（包括新增35个）143个，下调蛋 白（包括消失20个）107个。 3 GO注释（根据差异蛋白点的生物学过程） This classi?cation was produced based on the analysis using GOSlimViewer tool at Agbase database (/). This classi?cation was produced based on the analysis using GOSlimViewer tool at Agbase database (/). 3 GO注释（根据差异蛋白点的分子功能） 图4.1. 差异蛋白点相互作用网络（ STRING database） 4 蛋白功能相互作用网络分析与讨论 图4.2. 蛋白功能讨论（MDV感染后T细胞瘤形成与发展的可能途径） MDV感染后T细胞瘤形成 与发展的可能途径 乙方有义务提供相应的执业资格证、执业印章等配合甲方工程招投标、承担的工程项目报建及建设施工过程中各类手续办理。