调节性t细胞治疗多发性肌炎的实验分析-experimental analysis of regulatory t cells in the treatment of polymyositis.docxVIP

军医进修学院博士学位论文 目 录 1.英文缩略词1 2.中文摘要3 3.英文摘要5 4.正文 4.1 第一节 豚鼠肌球蛋白诱导实验性小鼠自身免疫性肌炎模型的研制 4.1.1 前言9 4.1.2 材料和方法11 4.1.3 结果14 4.1.4 讨论17 4.1.5 参考文献20 4.1.6 第一节照片22 4.2 第二节 调节性 T 细胞在实验性小鼠多发性肌炎模型的表达及意义 4.2.1 前言33 4.2.2 材料和方法35 4.2.3 结果38 4.2.4 讨论39 4.2.5 参考文献41 4.2.6 第二节照片44 4.3 第三节 调节性 T 细胞回输治疗实验性小鼠多发性肌炎及机制研究 4.3.1 前言49 4.3.2 材料和方法50 4.3.3 结果54 4.3.4 讨论57 4.3.5 参考文献59 4.3.6 第三节照片61 5.综述 5.1 调节性 T 细胞与多发性肌炎 69 5.1.1 参考文献73  5.2 特发性炎性肌病及合并间质性肺病的自身抗体研究进展76 5.2.1 参考文献82 6.攻读学位期间发表论文情况85 7.致谢87  PAGE 87 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 EAM experimentalautoimmune myositis 实验性自身免疫性肌炎 PM polymyosits 多发性肌炎 IPM idiopathic polymyosits 特发性多发性肌炎 IIM idiopathic inflammatory myopathies 特发性炎性肌病 CFA complete Freund’s adjuvant 完全弗氏佐剂 PBS phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 HE haematoxylin eosin 苏木素-伊红 MHC-I major histocompability complex-I 主要组织相容性复合物-I CK creatine kinase 肌酸激酶 CKMb creatine kinase-MB 肌酸激酶同工酶 ALT alanine aminotransferase 谷丙转氨酶 AST aspartate aminotransferase 谷草转氨酶 IL-10 cytokine interleukin 10 人白细胞介素-10 TGF-β transforming growth factor-β 转化生长因子-β PBMC peripheral blood mononuclear cell 外周血单个核细胞 Treg regulatory T cells 调节性 T 细胞 FCM flow cytometry 流式细胞测量 TCR T cell receptor T 细胞受体 APC antigen presenting cell 抗原呈递细胞 EMG electromyography 肌电图 MACS Magnetic activated cell sorting 免疫磁珠分选 CD45 leukocyte common antigen 白细胞共同抗原 CTLA- 4 cytotoxic T lymphocyte-associated antigen- 4 细胞毒 T 淋巴细胞相关抗 原- 4   调节性 T 细胞治疗多发性肌炎的实验研究 中文摘要 目的： 1．建立豚鼠骨骼肌匀浆诱导实验性小鼠自身免疫性肌炎模型； 2．观察实验性小鼠自身免疫性肌炎（EAM）外周血及脾脏单个核细胞中 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 所占 CD4+ T 细胞的比例，探讨调节性 T 细胞与自身免疫 性肌炎的关系； 3. 观察 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 细胞回输前后 EAM 小鼠临床表现、肌电图的变 化，探讨 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 细胞对于炎性肌病的治疗价值；流式细胞 仪检测细胞回输前后 EAM 小鼠脾脏 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 细胞表面 PD-1 及 CTLA-4，双抗体夹心 ELISA 法检测外周血 IL-10、TGF-β的变化，探讨 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 细胞治疗炎性肌病的相关机制。 方法： 1. 豚鼠骨骼肌匀浆诱导的实验性小鼠自身免疫性肌炎（EAM）的建立：动物 机分为 2 组：对照组（n=10）予 PBS+CFA 免疫 6 周，EAM 组（n=10）予豚 骼肌匀浆+CFA 免疫 6 周。观察两组临床表现和肌肉组织形态学及白细胞 共同抗原（CD45）的表达；Roche E170 型全自动生化分析仪检测两组血 肌酶谱的变化；keypoint 肌电诱发电位系统检查两组肌肉电生理变化； 2. 随机选取 E