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蝴蝶兰的组织培养技术 学校：------------- 专业：园林植物与观赏园艺 姓名：------------- * 蝴蝶兰的组织培养技术 蝴蝶兰简介 蝴蝶兰组织培养 组织培养概述 * 蝴蝶兰的组织培养技术 组织培养的概述 植物组织培养,是指通过无菌操作把外植体接种于人工配制的培养基上,在人工控制的环境条件下进行离体培养的技术 目前植物组织培养已从实验室逐步走向大规模工厂化，在育苗方面取得了良好的进展，在农学﹑园艺﹑森林﹑药物等应用学科上，得到广泛的应用。 * 培养材料取材少，并且来源较为广泛。 管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。 培养的条件可以人为控制。 生长周期短﹑繁殖率高。 组织培养的特点 * 细胞融合 应用前景 快速繁殖某些稀有植物或有珍贵的经济作物 植物脱毒 植物次生代谢产物的生产 植物种质资源的离体保存 单倍体育种 胚胎培养的应用 * 蝴蝶兰的组织培养技术 蝴蝶兰简介 兰科(Orchidaceae) 蝴蝶兰属（Phalaenopsis） 原产于中国台湾、菲律宾、印尼、泰国、马来西亚等地。其花型奇特似蝶,花色鲜艳,花期持久, 被称为“兰花皇后”。 蝴蝶兰 (Phalaenopsis amabilis) * 蝴蝶兰作为四大洋兰之一，在国际花卉市场占有重要的地位，不仅作为重要的盆栽植物，其切花也被广泛应用。在国内蝴蝶兰经常被选购作为礼品赠送亲朋好友 ，在年宵花卉市场上也无比畅销。 蝴蝶兰商业价值 * 蝴蝶兰的组织培养技术 蝴蝶兰的繁殖方式 分株繁殖：蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株很少发育侧枝，分株繁殖系数极低 种子繁殖：种子小，胚发育不完全，没有胚乳及其他组织，自然条件下萌发率极低且产生实生苗变异性大 组织培养：是目前蝴蝶兰大规模生产的唯一途径。 * 蝴蝶兰的组织培养 外植体的选择 培养基配制及灭菌 外植体的消毒 诱导原球茎 生根培养 炼苗与移栽 原球茎的增殖 * 外植体的选择 茎尖及其周围组织较为幼嫩,容易脱分化并再分化成完整植株。 蝴蝶兰为单茎性植物,摘取茎尖会损失母株，而以为花梗外植体不伤害母株，繁殖周期短，形成的新植株易于移栽 因此,在实际应用中，利用带花芽的花梗作为外植体 * 培养基的配制 除了MS还需加入琼脂、活性炭、营养物质（椰汁、土豆泥、香蕉等）、植物调节剂（IAA、6BA、NAA等）、并用1mol/L的NaOH溶液或1mol/L的HCl溶液调节pH至5.4左右。 MS培养基一般由大量元素、微量元素、铁盐、有机物、调节物质等五大类。 * MS培养基配方 组成成分 数量(mg/l) 组成成分 数量(mg/l) NH4NO3 1650 Na2-EDTA 37.3 KNO3 1900 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 440 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 370 蔗糖 30 KH2PO4 170 pH 5.8 KI 0.83 肌醇 100.0 H3BO3 6.2 烟酸 0.5 MnSO4·4H2O 22.3 盐酸吡哆醇 0.5 ZnSO4·7H2O 8.6 甘氨酸 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 盐酸硫铵等 0.4 CoCl2·6H2O 0.025 * 外植体的消毒 外植体用自来水下冲洗干净 花梗放在用75%酒精消毒30s 无菌水清洗2-3遍 10%的次氯酸钠钠浸10min 无菌水冲洗4-5遍后待用。 切成长约1 cm 带腋芽的切段。 * 培养基的灭菌 无菌水、接种工具（解剖刀、镊子、垫纸等）也均采用此法灭 灭菌 将分装好的培养基放入高压灭菌器内，灭菌压力0.11-0.14 MPa、温度121 ℃、时间15-20 min * 诱导原球茎 将经过灭菌的外植体接种到MS+6-BA（6mg/L）+NAA(1mg/L)培养基上诱导形成早期原球茎 诱导条件： 温度25℃ 光强2000Lx 每天光照16 h * 将诱导的原球茎按3-5 个为一团接种到以MS+NAA(0.5mg/L) +6-BA（8mg/L）的椰汁的增殖培养基中形成丛芽 原球茎的增殖 增殖条件： 温度25℃ 光强2000Lx 每天光照16 h * 将蝴蝶兰丛生芽接种到生根培养基MS+6-BA（1mg/L）+ NAA（0.5mg/L）+15%的椰汁 生根培养 生根条件： 温度25℃ 光强2000Lx 每天光照16 h * 炼苗与移栽 瓶苗移栽前，将培养瓶放到栽培温室中炼苗3-4天。 待培养瓶内小苗根长至8-10 cm 左右，根数3-5条，叶数3-5片，叶宽1.5-2.5c