头孢曲松钠改善appps1双转基因ad模型小鼠早期认知功能障碍及其机制研究-ceftriaxone sodium improves early cognitive dysfunction and its mechanism in app ps 1 transgenic ad mice.docx

万方数据 万方数据 小结……………………………………………………………………82 参考文献………………………………………………………………83 结论……………………………………………………………………85 综述一 阿尔茨海默病转基因小鼠与认知功能障碍………………………86 综述二 阿尔茨海默病啮齿动物模型比较…………………………………97 致谢…………………………………………………………………………108 个人简历…………………………………………………………………109 中 中 文 摘 要 PAGE 10万方数据 PAGE 10 万方数据 头孢曲松钠改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠早期认知功能障 碍及其机制研究 摘 要 阿尔茨海默病（Alzheimer?s disease, AD）是一种以进行性认知功能障 碍和记忆力损害为主要临床表现的神经退行性疾病。AD 的主要神经病理 学特征是脑内 β 淀粉样多肽（β-amyloid peptides, Aβ）异常沉积形成老年 斑及神经细胞内 tau 蛋白过度磷酸化形成神经原纤维缠结。AD 的确切病 因尚不清楚，可能的机制包括 β 淀粉样肽沉积、炎症损伤、氧化应激、自 由基损伤等。其中，Aβ 级联学说被认为是 AD 发病的中心环节。该学说 认为 Aβ 聚集是始动因素，Aβ 聚集后损伤突触，激活神经胶质细胞并诱 发炎症反应，损伤突触传递和神经元功能，最终导致痴呆。近年研究发现， 脑内具有神经毒性的 Aβ 多为可溶性寡聚体形式，APP（amyloid precursor protein）转基因小鼠的记忆障碍通常发生在脑内淀粉样斑块出现之前，并 且伴有脑内可溶性 Aβ 水平的明显增高。因此，脑内可溶性 Aβ 增多在 AD 早期发病中发挥重要作用。可溶性 Aβ 寡聚体毒性作用有多个方面，包括 导致过氧化损伤、引起神经细胞凋亡、引起炎症反应、损伤突触功能等。 谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统内主要的兴奋性神经递质，谷氨酸能 神经元末梢向突触间隙释放神经递质谷氨酸，与突触后膜或前膜的谷氨酸 受体结合，通过参与突触传递可塑性、维持神经环路的功能，在认知、学 习、记忆等多种生理过程中发挥重要作用，也参与介导缺血性神经元损伤、 脑退行性病变等多种病理性损害。突触间隙内谷氨酸的清除主要是通过兴 奋性氨基酸转运体（excitatory amino transporters, EAATs）的摄取。目前发 现并克隆了 5 种 EAATs，包括 EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4 和 EAAT5。 海马、大脑皮质等与学习记忆功能密切相关的脑区主要表达 EAAT2，是 这些脑区内摄取谷氨酸的主要转运体，承担 90%以上的谷氨酸转运功能。 该转运体主要表达在星形胶质细胞，故又称为胶质细胞谷氨酸转运体 （glial glutamate transporter-1, GLT-1）。 Aβ 对谷氨酸能神经元系统以及谷氨酸转运体的影响近年受到关注。 研究发现，受 Aβ 神经毒性的影响，AD 模型动物及患者在 AD 早期脑内 即可出现 GLT-1 表达的减少。根据这一现象，我们推测 GLT-1 表达减少 及功能的下调，会影响谷氨酸的摄取和谷氨酸-谷氨酰胺循环过程，影响 兴奋性神经递质谷氨酸的再循环及利用效率，从而引起 AD 早期脑内突触 传递以及神经环路的功能障碍，导致学习记忆能力下降。因此，调制 GLT-1 以及参与谷氨酸-谷氨酰胺循环的转运体的表达可能有助于改善 AD 早期 的认知功能障碍，有可能成为减轻或减缓 AD 早期认知功能障碍出现的新 靶点。 Rothstein 等 2005 年在《Nature》上报道，β-内酰胺类抗生素，如头 孢曲松钠（Ceftriaxone, Cef），可以特异性地增加 GLT-1 的表达及其对谷 氨酸的摄取。因此，本研究旨在观察 β-内酰胺类抗生素 Cef 对 AD 模型小 鼠学习记忆能力、GLT-1 表达以及谷氨酸循环的影响，探讨 Cef 对 AD 模 型小鼠早期认知功能障碍的作用及其机制，为临床上 AD 的防治提供新线 索和思路。 第一部分 Cef 改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的认知功能障碍 本实验所采用的APPswe/PS1deltaE9双转基因AD模型小鼠（APP/PS1 AD 小鼠 ）是 以 C57BL/6J 小鼠为背景 ， 含有人 APPswedish 突变位 点 （ K595N/M596L ） 和人 PS1deltaE9 突 变 位 点 ， 是利用 PrP-hAPPK595N/ M596L痴呆症模型小鼠和PrP-PS1dE9痴呆症模型小鼠杂交培育而成。该模 型小鼠5月龄开始出现老年斑，12月龄出现大量老年斑，具有和A