通过调节jak2-stat3和wnt5a信号通路可能是缺血后处理及低温减轻全脑缺血性脑损伤的分子机制-the regulation of jak 2 - stat 3 and wnt5a signaling pathways may be the molecular mechanism of ischemic postconditioning and hypothermia to reduce global cerebral ischemi.docx

目录中文摘要……………………………………………………………………………3英文摘要……………………………………………………………………………3第一部分……………………………………………………………………………17材料和方法………………………………………………………………………17实验结果…………………………………………………………………………26讨论………………………………………………………………………………31参考文献…………………………………………………………………………35第二部分……………………………………………………………………………41材料和方法………………………………………………………………………42实验结果…………………………………………………………………………50讨论………………………………………………………………………………64参考文献…………………………………………………………………………68第三部分……………………………………………………………………………72材料和方法………………………………………………………………………73实验结果…………………………………………………………………………83讨论………………………………………………………………………………94参考文献…………………………………………………………………………99第四部分…………………………………………………………………………106材料和方法………………………………………………………………………107实验结果………………………………………………………………………111讨论……………………………………………………………………………120参考文献………………………………………………………………………123综述………………………………………………………………………………129致谢………………………………………………………………………………138研究生期间发表文章……………………………………………………………1393中文摘要先天性心脏病目前已经成为我国首位出生缺陷性疾病，先心病外科手术一直占中国大陆心脏外科手术的55-60%，是我国首位的心脏外科治疗的病种。虽然婴幼儿体外循环技术逐步完善提高，但是体外循环本质就是一个控制性缺血缺氧的过程，特别是在部分婴幼儿主动脉弓部手术，不可避免存在深低温、停循环、全脑缺血的过程，此时患者大脑将面临缺血-再灌注损伤及后续的潜在损伤。全脑缺血脑损伤本质主要是由于缺血、缺氧导致脑组织氧及能量代谢紊乱，并最终引起脑组织损伤。在全脑缺血的状态下，脑细胞的氧及能量的供给减少，无氧代谢增加，高能磷酸化合物的储备耗尽，同时继发一系列病理过程，如：兴奋性氨基酸(EAA)的细胞毒性激活、神经细胞内钙离子(Ca2+)超载、特定神经元细胞内氧自由基的过度形成、“瀑布式”自由基连锁反应、炎性细胞因子产生、游离脂肪酸的聚集、内环境紊乱等多个环节，如不加予干预，这些过程最终将导致脑细胞功能受损，进而分裂、死亡。近年来，大量研究证实，缺血后的器官组织血流恢复后在某些情况下能导致进一步的组织损伤和功能障碍，这种恢复血流灌注后引起的进一步损害称为缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusioninjury)。缺血/再灌注损伤机制十分复杂，其中涉及到内源性物质的触发和释放、细胞内及线粒体内钙超载、再灌注时氧自由基的爆发、中性粒细胞活化等诸多因素，相互间构成一个负反馈的网络，导致缺血器官组织血流恢复后进一步损伤。如何来减轻器官组织缺血/再灌注损伤，多年来大量研究试图通过找到有效的干预措施或药物治疗来实现，虽然发现有些药物或处理措施在实验动物身上有效，但到目前为止能成功应用于临床的仍然很少。2003年Zhao等发现心肌缺血后再灌注前进行反复、短暂的心肌缺血再灌注能保护心肌对抗随后的再灌注损伤，从而提出了缺血后处理的概念。缺血后处理是通过激发机体内在的保护机制，研究表明其中的机制可能包括保护性内源性物质的触发和释放，氧自由基的释放减少，以及与细胞内的部分信号通路激活有关等。因缺血后处理能在缺血后实施，具有较强的可控性，临床操作简便易行，其潜在的临床应用可能更直接有效的。目前国内外已经有大量的试验证实低温对全脑缺血的脑保护作用。低温的脑保护作用不仅局限在减少能量代谢和氧耗，还具有抑制兴奋性氨基酸释放、抑制4氧自由基的过度形成和细胞内钙离子(Ca2+)超载，明显增加脑组织对缺血的耐受性。临床心脏外科手术体外循环中已经成功地将不同程度的低温应用于术中脑保护，特别是深低温停循环技术应用于部分婴幼儿主动脉弓部手术。JAK(Januskinase)-STAT(signaltransducerandactivatoroftranscription)是近年来新发现