小鼠标准化脊髓损伤模型的建立及mir-31转基因小鼠脊髓损伤机制研究-establishment of standardized spinal cord injury model in mice and study on spinal cord injury mechanism of mir - 31 transgenic mice.docxVIP

3.3PCR和免疫荧光的差异28结论.................................................................................................................................30参考文献.............................................................................................................................31综述.................................................................................................................................32致谢.................................................................................................................................40在学期间承担/参与的科研课题与研究成果....................................................................41个人简介.............................................................................................................................42小鼠标准化脊髓损伤模型的建立及miR-31转基因小鼠损伤机制研究摘要目的：1.通过比较两种构建小鼠脊髓击打损伤模型仪器各自的特点和优势，以期探索脊髓击打损伤模型建立的标准化。2.对脊髓损伤的miR-31转基因小鼠继发性损伤的恢复状况进行了解，进一步掌握miR-31调控或改善脊髓损伤微循环的机制。方法：第一部分：比较两种构建小鼠脊髓击打损伤模型仪器将40只小鼠随机分为两组，分别采用自制Allen脊髓打击器（A组，n=20）和ImpactorM-Ⅲ脊髓撞击器（B组，n=20）进行击打，建立小鼠脊髓损伤模型。术后，于1d、3d、5d、7d、14d、21d六个时间节点，采用BBB运动功能评分对小鼠下肢恢复情况进行评估，记录数据。并在3d、7d、14d、21d四个时间节点取实验小鼠脊髓损伤处进行HE染色。第二部分：miR-31转基因小鼠脊髓损伤机制研究使用ImpactorM-Ⅲ脊髓撞击器分别对FVB小鼠（A组，n=30）和miR-31转基因小鼠（B组，n=30）进行击打，成功建立小鼠脊髓损伤模型。术后，于3d、7d、14d、21d进行BBB评分、HE染色、免疫荧光检测和荧光定量PCR检测。结果：第一部分：两组脊髓损伤模型在1d、3d、5d、21d四个时间节点恢复情况无明显差异（P0.05）。而在7d、14d，B组小鼠的脊髓损伤恢复状况明显优于A组，差异具有统计学意义（P0.05）。在组织形态切片上差异不大。第二部分：两组不同小鼠在制作脊髓损伤模型后，恢复趋势虽大体相同，但仍有差异存在。BBB评分显示在7d、14d，B组小鼠的脊髓损伤恢复状况优于A组。在组织形态上差异不大，只在14d、21d两个时间点上存在少量差异。荧光和PCR结果I显示：Nestin的表达量趋势两组基本相同，只在14d、21d两个时间点上B组优于A组；NSE在表达上两组存在差异，B组的表达量大于A组。结论：第一部分：两种击打脊髓的实验仪器均可成功建立小鼠的脊髓损伤模型，采用ImpactorM-Ⅲ脊髓撞击器构建的脊髓击打损伤模型小鼠恢复较自制Allen脊髓打击器更快速、稳定。第二部分：推测miR-31在脊髓损伤后可能发挥着促进神经干细胞再生，改善脊髓损伤模型脊髓内微环境，促进脊髓损伤的恢复的作用。关键词：脊髓；损伤；模型；miRNA-31；小鼠IIEstablishastandardizedmodelofspinalcordinjuryinMiceandResearchonthedamagemechanisminmiR-31transgenicmiceAbstractObjective：Tostandardizedateofthespinalcordbeatinginjurymodelinmice,twomodleswereestablishedbycomparingtwokindsofspinalcordbeatinginjurymodelinstruments’ad