维生素c e对过量氟导致机体损害的干预作用分析-analysis of intervention effect of vitamin c e on body damage caused by excessive fluorine.docx

新疆医科大学医学博士学位论文 — PAGE 4 — PAGE 5 和 c-myc 蛋白表达明显下调，bax 和 p53 蛋白表达明显上调，说明过量氟可通过拮 抗 bcl-2 和 c-myc 蛋白表达以及促进 bax 和 p53 蛋白表达而促进肾细胞凋亡的发生。 原位杂交技术检测结果表明，染氟后大鼠肾细胞 bcl-2mRNA 水平比正常对照组显著 降低，提示过量氟使肾细胞 bcl-2 基因 mRNA 转录水平降低，从而促进肾细胞凋亡。 高氟染毒后大鼠脑组织 bcl-2 蛋白表达明显下调，bax 蛋白和 p53 蛋白表达明显上调， 而 c-myc 蛋白表达无明显变化。我们采用原位杂交技术检测脑细胞 bcl-2mRNA 水平， 结果发现染氟组与正常对照组相比，脑细胞 bcl-2mRNA 水平降低，但无明显差异。 染氟的同时补充 VC 和/或 VE 对肝肾脑细胞凋亡相关蛋白表达均有显著影响。其中 肝脏各干预组 bcl-2、bax 和 c-myc 蛋白表达明显上调，p53 蛋白在 VC 低剂量组， VE 高剂量组和联合干预组明显下调，bcl-2mRNA 表达水平随着 VC 干预剂量的增 加而相应递增，呈剂量-效应关系，VE 各剂量干预和联合干预均可使 bcl-2mRNA 水 平显著增加。肾脏 bcl-2 和 c-myc 蛋白在各干预组表达明显上调，且在 VC 各剂量干 预组上调幅度较大，VC 干预组随着干预剂量的增加 bax 和 p53 蛋白表达呈下降趋 势；在 VE 干预组低至中剂量组 bax 和 p53 蛋白表达呈下降趋势，而到高剂量时却 明显上调，bax 和 p53 蛋白的表达在联合干预组最低。bcl-2mRNA 水平随着 VC 干 预剂量的增加而增加，呈明显的剂量-效应关系，VE 低和中剂量干预可使 bcl-2mRNA 水平显著增加，在各干预组中联合干预效果为最佳。大脑各干预组 bcl-2 和 c-myc 蛋白表达明显上调，bax 和 p53 蛋白表达显著下调，联合干预组各蛋白表达变化最 为显著；各干预组 bcl-2mRNA 水平均比染氟组显著增加，并随着 VC 和 VE 干预剂 量的增加而上调，呈明显的剂量-效应关系。 结论： 干预 VC、VE 均可使大鼠尿氟含量显著升高，其中 VC 和 VE 干预剂量低（分 别为 50 mg·kg-1·d-1 和 25 mg·kg-1·d-1）时效果最为明显。长期过量氟摄入导致大鼠严 重的氟斑牙和氟骨症的发生。VC、VE 可使氟斑牙和氟骨症症状减轻即对氟中毒大 鼠骨骼损害有一定的拮抗作用，VE 单独干预和 VC、VE 联合干预效果较 VC 单独 干预明显。 过量氟引起的肝、肾、脑损伤中氧化应激起重要作用。VC、VE 在一定剂量范 围内可有效拮抗过量氟导致的脂质过氧化作用，对氟中毒大鼠肝、肾、脑组织有明 显的保护作用。 光、电镜结果表明，过量氟引起大鼠肝、肾、脑组织不同程度的组织形态学和 超微结构的损害，肝细胞显示凋亡的组织形态学和超微结构特征，同时肾细胞也具 有凋亡的特征性超微结构。高氟染毒对大鼠肝脏的损害最为严重，其次为肾脏，再 次为大脑。这可能与机体各器官组织对过量氟损害的敏感性不同有关。VC、VE 的  中文摘要 干预对过量氟引起的大鼠各组织损害以及肝、肾细胞凋亡有不同程度的拮抗作用， 其中联合干预效果最为明显，表明干预的效果与干预剂量、单独或联合干预和氟中 毒损害的靶器官有关。 过量氟导致肝、肾和脑细胞凋亡以及 bcl-2、p53、bax 和 c-myc 蛋白及 bcl-2mRNA 表达的显著变化，说明 bcl-2、p53、bax 和 c-myc 等调控蛋白及 bcl-2mRNA 参与氟 中毒大鼠肝、肾、脑细胞凋亡的发生与发展过程。肝、肾、脑细胞中 bcl-2 蛋白以 及 bcl-2mRNA 表达一致性下调，p53 和 bax 蛋白表达一致性上调，c-myc 蛋白表达 却无明显规律，肝细胞中表达上调，肾细胞中表达下调，而脑细胞中其表达无明显 变化，表明 bcl-2 基因有明显的促凋亡作用，p53 和 bax 有抑制凋亡的作用，c-myc 却表现出双重作用。染氟同时干预 VC、VE 可拮抗肝、肾、脑细胞凋亡，对过量氟 引起的大鼠肝、肾、脑细胞毒性有明显的保护作用。VC 和 VE 单独和联合干预以及 不同剂量干预的影响程度间存在一定的差异。其可能原因可从维生素的剂量-效应， 不同基因的表达水平及其对氟化钠和 VC、VE 作用的敏感程度，氟的毒性作用和对 机体造成的脂质过氧化作用和维生素对其拮抗作用的靶器官等多个角度考虑。 关键词：氟中毒； Wistar 大鼠； 抗坏血酸； 维生素 E； 干预；骨骼损害；抗 氧化酶；组织形态学； 超微结构； 细胞凋亡； 相关基因及蛋白 新疆