铜藻多糖的酶法修饰 活性及应用分析-enzymatic modification activity and application analysis of copper algae polysaccharide.docxVIP

铜藻多糖的酶法修饰、活性及应用研究摘要随着海洋资源的不断开发，海藻中的多种天然活性物质逐渐成为国内外的研究热点。其中，多糖因其显著的抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等功能，受到诸多研究学者的青睐。铜藻，属马尾藻属海洋植物，在我国浅海区域广泛分布，资源丰富，目前被广泛应用于医药、食品、饲料加工等行业。同时有研究表明铜藻多糖具有显著的生物活性及药理作用。采用响应面法对铜藻多糖的葡聚糖酶酶解工艺进行优化，确定生物酶法降解的最佳工艺参数为：反应温度48℃，反应pH4.8，酶液浓度3.6%。在此条件下经验证实验得还原糖含量平均为0.550mg/mL。同时，根据方差分析，得出因素的主效应关系为：酶液浓度＞水解温度＞水解pH。采用DEAE-SepharoseFastFlow离子柱结合SephadexG-25凝胶柱法对SHPA及酶解后组分进行层析分离，得到SHPAP、SHPH1、SHPH2和SHPH3，其平均分子量分别为1.79×103KDa、78.31KDa、21.42KDa、10.54KDa。GC-MS检测显示各组分的单糖组成基本一致，均含有葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、半乳糖，但SHPH1、SHPH2、SHPH3中未检出木糖。FTIR图谱对比说明，多糖经酶解后基本化学I结构未发生明显改变。SEM结果显示，酶解前铜藻多糖为疏松多孔的碎片状，酶解后铜藻多糖为致密带有褶皱的膜状物。对比测定SHPAP、SHPH1、SHPH2和SHPH3四个组分对超氧阴离子自由基、羟基自由基、ABTS自由基和DPPH自由基的清除能力及其还原力，结果表明，四个多糖组分对超氧阴离子、ABTS、DPPH自由基清除能力的大小排序为：SHPH3SHPH2SHPH1SHPAP，但是在羟基自由基清除实验和还原力实验中，SHPH2抗氧化活性大于SHPH3。SHPAP、SHPH1、SHPH2、SHPH3及SHPH3-多肽复配物的吸湿与保湿试验结果显示，复配物和SHPH3的吸湿性最好，其次是SHPH2和SHPH1，而SHPAP的吸湿性最差。保湿性大小依次降低为：复配物SHPH3SHPH2SHPH1SHPAP。SHPH3O/W型保湿霜相关质量指标检验结果显示铜藻多糖保湿霜产品耐寒、耐热、中性，密度为0.92485g/mL，并且经皮肤测试后发现涂布性和保湿较好。同时SHPAP、SHPH1、SHPH2和SHPH3的抑菌圈实验表明铜藻多糖酶解后抑菌活性提高。关键词：铜藻多糖，酶解，活性研究，应用研究IIENZYMATICDEGRADATION,ACTIVITYANDAPPLACATIONSTUDYOFPOLYSACCHARIDESFROMSARGASSUMHORNERIABSTRACTS.horneri,asargassaceaebrownalga,isoneofthemaincomponentsinthesubtidalseaweedfloraextensivelydistributedinChinaYellowSeaandEastChinaSea,whichisrichinvitamins,aminoacids,dihomo-gamma-linolenicacidandpolysaccharides.S.hornerihasbeenusedasfundamentalsourceofhumanfoodanddrugintraditionalChinesemedicineforcenturies.Inthepreviousstudies,thesulfatedpolysaccharideandotherwater-solublenaturalextractsfromS.Horneriexertedpotentanti-allergicandantioxidantactivityevaluatedbyexaminingtheradicalscavengingactivityon2,2’-Azino-bisIII(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonate)(ABTS),1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH),hydroxylandsuperoxideanionradicals.ToenablethepracticaluseofSargassumhorneriasamedicinalmarineresource,itisimportanttoobtaininformationaboutitschemicalcompositionandbioactivities.Inthispaper,theenzymehydrolysis,antioxidantactivity,anti-tumoractivity,antifungalactivity,moistur