硒对砷中毒保护作用的实验分析-experimental analysis on the protective effect of selenium on arsenic poisoning.docxVIP

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2018-08-10 发布于上海
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硒对砷中毒保护作用的实验分析-experimental analysis on the protective effect of selenium on arsenic poisoning

新疆医科大新疆医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 硒对砷中毒保护作用的实验研究研究生：李萍导师：肖辉教授摘要目的：通过体外、体内实验，研究亚硒酸钠（NaSeO2）单独及与磷酸钠（Na3PO4）联合应用对砷中毒的保护作用及其机制，为硒在砷中毒防治方面提供新的思路。方法：（1）体外实验：采用小鼠肝细胞原代培养技术，用一定浓度的亚砷酸钠（NaAsO2）处理小鼠肝细胞，同时分别加入不同剂量的亚硒酸钠、磷酸钠，通过噻唑蓝还原法（MTT），测定各组细胞吸光度值（OD），分析亚硒酸钠单独及与磷酸钠联合应用时对砷染毒小鼠肝细胞增殖的影响。（2）体内实验：SPF 级昆明种（KM）小鼠 70 只，按体重随机分为 7 组：正常对照组、亚砷酸钠模型组、亚硒酸钠对照组、磷酸钠对照组、亚硒酸钠干预组、磷酸钠干预组、亚硒酸钠+磷酸钠干预组共 7 组。分别给以不同浓度的亚硒酸钠、磷酸钠进行干预，于 60d 结束实验并取材，采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活性（SOD）、硫代巴比妥法检测丙二醛（MDA）含量、紫外分光法检测髓过氧化物酶（MPO）含量；高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法（HPLC-HGAFS）测定 KM 小鼠肝、肾组织中 MMA（一甲砷酸）和 DMA （二甲砷酸）含量。结果：（1）体外实验：低、中剂量（3 μ mol/L、5 μ mol/L、10 μ mol/L）的亚硒酸钠组 OD 值明显高于亚砷酸钠模型组（P＜0.05）；亚硒酸钠（3 μ mol/L）+ 磷酸钠（7.5 μ mol/L）干预组 OD 值明显高于其它干预组（P＜0.05）（2）体内试验：亚砷酸钠模型组小鼠体重减轻，脏器系数升高，肝、肾中 SOD、MPO 含量低于正常对照组，MDA 含量高于正常对照组（P＜0.05）；亚硒酸钠干预组体重明显高于亚砷酸钠模型组（P＜0.05），脏器系数高于亚砷酸钠模型组（P＜0.05），肝、肾中 SOD、MPO 含量明显高于亚砷酸钠模型组（P＜0.05），MDA 含量低于亚砷酸钠模型组（P＜0.05）；亚硒酸钠+磷酸钠干预组体重高于亚砷酸钠模型组（P＜0.05），脏器系数低于亚砷酸钠模型组（P＜0.05），小鼠肝、肾中 DMA、MMA 较砷模型组降低（P＜0.05）。亚硒酸钠干预组 SOD 活性、MPO、MDA、DMA、MMA 含量与亚硒酸钠+磷酸钠干预组含量未见差异（P＞0.05）结论：（1）亚硒酸钠低剂量（3 μ mol/L）对砷染毒小鼠肝细胞增殖有促进作用，而亚硒酸钠高剂量（25 μ mol/L）对砷染毒小鼠肝细胞增殖无促进作用，未见磷酸钠对亚硒酸钠促进砷染毒小鼠肝细胞增殖有协同作用。（2）亚硒酸钠对亚砷酸钠造成小鼠肝、肾的脂质过氧化损伤具有明显的保护作用，未见磷酸钠与亚硒酸钠联合应用对砷造成小鼠肝、肾的脂质过氧化损伤的协同效应。（3）硒对砷中毒具有一定的保护作用。关键词：亚砷酸钠；亚硒酸钠；磷酸钠；脂质过氧化；实验研究 The experiment study of protective effect of selenium on Arsenic poisoning Postgraduate:Li Ping Supervisor:Xiao Hui professor Abstract Objective: By animal in vitro and in vivo, study of sodium selenite alone and with Trisodium phosphate combined application of arsenic poisoning of protection and its mechanism, for Sodium selenite on prevevtion and treatment of Arsenic poisoning provied new ideas. Methods: (1)In vitro, Using primary mouse liver cell culture technology, After processed cell by certain dosages of NaAsO2, different dosages of Sodium selenite and Trisodium phosphate were added to nutrient fluid, then through MTT, measured OD, Study influnce of sodium selenite alone or combined with Trisodium phosphate of arsen