髓样分化因子-2md-2基因的多态性与中国荷斯坦奶牛临床型乳腺炎易感性的相关性的研究-correlation between polymorphism of myeloid differentiation factor - 2md - 2 gene and susceptibility to clinical mastitis in chinese holstein cows.docxVIP

髓样分化因子-2md-2基因的多态性与中国荷斯坦奶牛临床型乳腺炎易感性的相关性的研究-correlation between polymorphism of myeloid differentiation factor - 2md - 2 gene and susceptibility to clinical mastitis in chinese holstein cows.docx

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髓样分化因子-2md-2基因的多态性与中国荷斯坦奶牛临床型乳腺炎易感性的相关性的研究-correlation between polymorphism of myeloid differentiation factor - 2md - 2 gene and susceptibility to clinical mastitis in chinese holstein cows

本论文经答辩委员会全体委员审查,确认符合安徽师范大学硕士 学位论文质量要求。 答辩委员会签名: 主席:(工作单位、职称) 委员: 导师: 学 位 论 文 独 创 性 声 明 本 人 声 明 所 呈 交 的 学 位 论 文 是 本 人 在 导 师 的 指 导 下 进 行 的 研 究 工 作 及 取 得 的 研 究 成 果 ,与 我 一 同 工 作 的 同 志 对 本 研 究 所 做 的 任 何 贡 献 均 已 在 论 文 中 作 了 明 确 的 说 明 并 表 示 谢 意 ,除 文 中 特 别 加 以 标 注 和 致 谢 的 地 方 外 ,论 文 中 不 包 含 其 他 人 已 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 。 学位论文作者签名: 签字日期: 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本 学 位 论 文 作 者 完 全 了 解 安 徽 师 范 大 学 有 关 保 留 和 使 用 学 位 论 文 的 规 定 :学 校 有 权 保 留 并 向 国 家 有 关 部 门 或 机 构 送 交 论 文 的 复 印 件 和 电 子 版 , 允 许 学 位 论 文 被 查 阅 和 借 阅 。 本 人 授 权 安 徽 师 范 大 学 可 以 将 学 位 论 文 的 全 部 或 部 分 内 容 编 入 有 关 数 据 库 进 行 检 索 , 可 以 采 用 影 印 、 缩 印 或 其 它 复 制 手 段 保 存 、汇 编 学 位 论 文 。 保 密 的 学 位 论 文 在 解 密 后 适 用 本 授 权 书 。 学位论文作者签名: 导师签名: 签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日 学位论文作者获学位后去向: 工作单位: 电话: 通讯地址: 邮编: · ·T· 髓样分化因子-2(MD-2)基因的多态性与中国荷斯坦 奶牛临床型乳腺炎易感性相关性的研究 摘 要 全世界范围内, 每年都会有大量奶牛因患乳腺炎而被淘汰,使奶牛产业损失巨 大。乳腺炎通常是乳腺产生的免疫炎性反应,引发奶牛感染乳腺炎的致病因素有很 多种,其中革兰氏阴性菌是引发临床型乳腺炎的主要致病因素。研究指出,作为 LPS/TLR4 信号通路的上游关键因子,当革兰氏阴性菌被宿主识别时,MD-2 在介导 LPS 与 TLR4 形成复合物从而引发一系列的免疫炎性反应的过程中起到至关重要的 作用。人们对 MD-2 与奶牛临床型乳腺炎易感性的关系却知之甚少。 本研究首次利用 PCR-SSCP 的方法检测 MD-2 基因的单核苷酸多态性(SNP), 并对其与中国赫斯坦奶牛临床型乳腺炎的易感性做相关性分析。本研究在 MD-2 基 因所包含的 5 个外显子区以及 3UTR 区均未发现单核苷酸多态位点,而在启动子区 发现了 5 个单核苷酸多态位点,分别是 g.-2173 G→C, g.-2148 C→T, g.-2089 G→T, g.-555 A→G, g.-121 A→C。在由引物 P1 扩增的产物中检测到六种基因型(EE, FF, EF, EQ, EM, EN),其中包括 3 个 SNP 位点(g.-2173 G→C, g.-2148 C→T, g.-2089 G→T), 其 中 g.-2148 C→T 只位于等位基因 N 中。在由引物 P4 扩增的产物中检测到两种基因 型(CD, DD),包含 1 个 SNP 位点 (g.-555 A→G),且这个 SNP 位点位于等位基因 D 中;在由引物 P5 扩增的产物中检测到三种基因型(AA, BB, AB),也仅包括 1 个 SNP 位点 (g.-121 A→C),这个 SNP 位点位于等位基因 B 中。 在由引物 P1 扩增的片段中检测到的六种基因型(EE, FF, EF, EQ, EM, EN)中,等位 基因 F 占 42.76%,属于优势等位基因,具有高度多态(PTC0.5);在由引物 P4 扩增 的片段中检测到的两种基因型(CD, DD)中,等位基因 D 占 53.85%,属于优势等位基 因,具有中度多态(0.25PTC<0.5);在引物 P5 扩增的片段中检测到的三种基因型(AA, AB, BB)中,等位基因 A 占 83.71%,属于优势等位基因,具有低度多态(PTC<0.25)。 遗传连锁分析显示,等位基因 A 和 M 属于完全连锁关系(P<0.01), 等位基因 B 和 F 属于高度连锁关系 (P<0.05)。X2 test 显示在启动子区引物 P5 扩增的区域的基因 型处于 Hardy-Weinberg 平衡状态 (P>0.05),然而在启动子区引物 P1 和 P4 扩增的 区域的基因型没有达到 Hardy-Weinberg 平衡状态(P<0.01)。此

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