胃癌血清的表面增强拉曼光谱分析-surface enhanced raman spectroscopy analysis of gastric cancer serum.docxVIP

胃癌血清的表面增强拉曼光谱研究 摘 要 中国是胃癌发病率及死亡率最高的国家之一，胃癌发病人群逐年呈年轻化 发展。早期胃癌的诊断可以有效的提高胃癌治疗的存活率，对延长生命，提高 生活质量具有重大意义。在诊断过程中，如何快速、无创诊断胃癌不仅可以促 进现阶段胃癌治疗的进步，开创的新方法、新技术也将为其他恶性肿瘤的诊断 提供技术支持。表面增强拉曼光谱技术(SERS)是一种可以探测单分子拉曼光谱 的高灵敏检测手段，较常规拉曼信号提高了十四个数量级，且信息含量比荧光 光谱丰富，拉曼信号之间不存在如荧光光谱般的严重重叠。本文以金溶胶及金 溶胶膜为增强基底，对胃癌患者与健康人的血清进行了 SERS 光谱探测和分 析，为 SERS 方法诊断胃癌提供统计学依据，也为寻找无创、快速诊断识别胃 癌的新方法提供实验基础。 本文以金溶胶及金溶胶膜为增强基底，对胃癌患者与健康人的血清进行 SERS 光谱探测，通过对比分析拉曼信号的增强效果，发现常规拉曼光谱中，仅 有 1004cm-1 特征峰，在加入金溶胶、金溶胶膜增强后，血清拉曼光谱强度明显 增强，且信号峰位增多，在 491 cm-1、637 cm-1、725 cm-1、816 cm-1、893 cm-1、 959 cm-1、1004 cm-1、1031 cm-1、1094 cm-1、1245 cm-1、1130 cm-1、1207 cm-1、 1325 cm-1 、1392 cm-1、1443 cm-1、1571 cm-1 及 1652 cm-1 均出现了明显的拉曼信 号，通过对比几种常见生物大分子的 SERS 光谱，确定特征峰位振动模式及归 属，血清 SERS 光谱中，拉曼信号主要归属于氨基酸，其次是核酸、糖类及脂 类。基于金溶胶及金溶胶膜的血清 SERS 光谱整体相似，金溶胶膜的信号强度 好于金溶胶的，但个别峰位增强效果不同，可能由于金溶胶膜制备中纳米粒子 吸附在石英片上，破坏了溶胶粒子的单一分散性，纳米粒子堆积使粒径分布范 围较广，在与血清分子吸附结合时会有不确定性，使得光谱信号有杂峰干扰。 对比分析胃癌及健康人血清 SERS 光谱的差异，较健康人血清 SERS 光谱 强度，胃癌患者血清 SERS 光谱强度在 493cm-1、551cm-1、636cm-1、653cm-1、 i ii ii 723cm-1、1094cm-1、1127 cm-1、1237 cm-1、1445 cm-1 及 1651 cm-1 处较高，在 1004 cm-1、1029 cm-1 及 1127 cm-1 处较低，在 863 cm-1、961 cm-1 及 1368 cm-1 差 异不明显。归属于核酸的峰位在胃癌血清光谱中都较高，除归属于色氨酸 S-S 伸缩振动的 551cm-1 的光强较高，显示了色氨酸含量稍高外，大部分归属于蛋 白质的峰位在胃癌血清中较低。医学研究结果显示，生物体组织由于癌变，癌 细胞无限增殖，新陈代谢活跃，消耗了大量蛋白质以补充能量，使得胃癌血清 中核酸含量普遍高于健康人血清中的含量，而蛋白质含量较低。 结合多元统计分析方法，先对血清 SERS 光谱冗余数据中重复变量进行剔 除，利用主成分分析方法对精简变量提取主成分，结合线性判别分析得到灵敏 度、特异性、判别准确率分别为 86.1%、96.2%、92.1%。利用主成分提取方法 结合线性判别对胃癌及正常组织匀浆后上清液的 SERS 光谱进行分类识别，灵 敏度、特异性、判别准确率分别为 88.5%、90%、89.3%，说明该方法较为适用 于胃癌 SERS 光谱的判别，也为后期 SERS 光谱技术识别诊断癌症提供实验基 础。 关键词：胃癌；表面增强拉曼光谱(SERS)；血清；金溶胶；主成分分析；线性 判别分析 PAGE PAGE iii Surface-Enhanced Raman Spectroscopy for Gastric Cancer and Normal Serum Abstract Gastric cancer is one of the most common malignant tumors with high recurrence rate and mortality rate in China, and more and more young people suffer from gastric cancer. The early diagnosis of gastric cancer can be effectively improved the survival of gastric cancer treatment, and of great significance to improve the