显脉金花茶叶化学成分及研究测试方法分析-analysis of chemical constituents and research and testing methods of camellia nitidissima leaves.docxVIP

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2018-08-10 发布于上海
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显脉金花茶叶化学成分及研究测试方法分析-analysis of chemical constituents and research and testing methods of camellia nitidissima leaves.docx

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显脉金花茶叶化学成分及研究测试方法分析-analysis of chemical constituents and research and testing methods of camellia nitidissima leaves

HYPERLINK \l _bookmark0 作者声明 66 HYPERLINK \l _bookmark1 个人简历 67 PAGE PAGE 10 中文摘要目的：以显脉金花茶(Camellia euphlebia Merr.ex Sealy)叶为研究对象，分离分析其石油醚提取部位和氯仿提取部位及乙酸乙酯提取部位的化学成分，并利用 GC-MS 技术对显脉金花茶叶脂溶性成分进行了定性分析，在化学研究之后，选择山奈酚作为含量测定指标，建立了测定显脉金花茶叶中山奈酚的 HPLC 分析方法，为显脉金花茶叶的质量标准制定提供了方法和依据，本研究对进一步合理开发和利用该植物资源具有重大的意义。方法：显脉金花茶干燥叶用95%乙醇回流法提取得到乙醇总提取物，用系统溶剂分离法分得其极性不同的石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和水饱和正丁醇部位；采用硅胶吸附色谱法、减压硅胶柱层析、重结晶法等现代分离方法和技术对其化学成分进行分离和纯化，对分得的单体化合物利用理化检验及UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱方法进行结构鉴定；将显脉金花茶叶石油醚部位经柱层析分离得到油状流份，以氢氧化钾-甲醇溶液进行甲酯化处理后利用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）分别对它们的脂溶性成分进行分离和鉴定。采用利用高效液相色谱法测定显脉金花茶叶中山奈酚的含量。结果：从显脉金花茶叶中石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位分离得到10个化合物，鉴定了7个化合物，分别为：β-谷甾醇（β-sitosterol）， α-菠菜甾醇（α-spinasterol），正三十四醇（n-tetratriacontanol），β-香树素（β-amyrin），齐墩果酸（oleanic acid），olibanumol-L,山奈酚（kaempferol），采用GC-MS联用法对显脉金花茶叶石油醚部位的脂溶性成分进行了分离鉴定，结果分离鉴定了其中的20个组分。HPLC法测定显脉金花茶中山奈酚的含量，山奈酚在0.10μg-0.40μg范围内线性关系良好，平均回收率为 99.84%（RSD=1.59%），测得山奈酚的含量为0.3182-0.3640mg/g。结论：从显脉金花茶叶提取物中共分离了10个化合物，鉴定了7个，其中5个为首次从该品种金花茶中鉴定出来，3个为首次从该属植物中分离鉴定出来。采用GC-MS法对显脉金花茶叶石油醚部位的脂溶性成分进行分离和鉴定，鉴定了20个化学成分，为首次从该植物中分离鉴定。用 HPLC法对显脉金花茶叶中山奈酚进行定量研究，建立了测定山奈酚的 HPLC含量测定方法，本方法简单，快速，重现性好，结果准确可靠，为显脉金花茶叶的质量评价研究提供了科学依据。关键词：显脉金花茶叶；化学成分；山奈酚；定量分析 Studies on the Chemical Constituents and Quality Control of Camellia euphlebia Merr.ex Sealy. ABSTRACT Objective: Study on the chemical constituents of petroleum ether portion、chloroform portion and ethyl acetate portion about the leaves of Camellia euphlebia Merr.ex Sealy. The hydrophobic constituents were analyzed and identified by GC-MS technique. A stable and repeatable HPLC method was established for the content of kaempferol in Camellia euphlebia Merr.ex Sealy. for determination, which provided a reliable technique for the establishment of the quality standard of Camellia euphlebia Merr.ex Sealy. Therefore, The results provide a scientific basis for the comprehensive exploitation and utilization of this herb. Methods: The all alcoholic extracts obtained from the dried