通阳益气法对心肌梗死大鼠促血管新生作用及mekerk信号通路的影响-effects of tongyang yiqi method on angiogenesis and mekerk signaling pathway in rats with myocardial infarction.docxVIP

目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 中文摘要 I HYPERLINK \l _bookmark1 Abstract V HYPERLINK \l _bookmark2 英文缩略词表 X HYPERLINK \l _bookmark3 前 言 1 HYPERLINK \l _bookmark4 第一部分 理论研究 5 HYPERLINK \l _bookmark5 中医对冠心病和血管新生的认识及通阳益气法的提出 5 HYPERLINK \l _bookmark6 1 中医古代文献对冠心病的相关论述 5 HYPERLINK \l _bookmark7 2 阳气不通与心肌缺血 9 HYPERLINK \l _bookmark8 3 通阳益气与血管新生 11 HYPERLINK \l _bookmark9 第二部分 实验研究 16 HYPERLINK \l _bookmark10 实验一 心肌梗死大鼠模型制备及通阳益气法促血管新生的作用16 HYPERLINK \l _bookmark11 实验二 通阳益气法对心肌梗死大鼠血清 IL-6、TGF-β的影响 24 HYPERLINK \l _bookmark12 实验三 通阳益气法对心肌梗死大鼠 VEGF、bFGF 的影响 29 HYPERLINK \l _bookmark13 实验四 通阳益气法对心肌梗死大鼠 MEK/ERK 信号通路的影响 46 HYPERLINK \l _bookmark14 结 语 59 HYPERLINK \l _bookmark15 参考文献 61 HYPERLINK \l _bookmark16 附 录 69 HYPERLINK \l _bookmark17 文献综述 69 HYPERLINK \l _bookmark18 致 谢 87 I I 中文摘要 研究目的： 通过建立心肌梗死大鼠模型，从形态学（HE 染色，CD34 染色切片）、 炎症因子（IL-6）、生长因子（TGF-β，VEGF，bFGF）、信号通路（MEK/ERK 通路）多方面进行研究，观察通阳益气法促血管新生的作用和机制。 研究方法： 选用健康纯种 SPF 级 SD 雄性大鼠 80 只，饲养于 SPF 屏障环境。适应 性喂养 1 周后，结扎左冠状动脉制备心肌梗死模型。将造模成功者随机分 为通阳益气组（T）、葱白组（C）、黄芪组（H）、麝香保心丸组（S）、 模型组（M），每组 10 只，另设假手术组(J)10 只。术后第三天开始灌胃 给药，药物干预 28 天后抽血、取材。应用 HE 染色观察梗死边缘区的病 理变化，CD34 免疫组化染色检测心肌梗死边缘区微血管数量及微血管密 度；放射免疫法检测血清 IL-6、TGF-β的含量；Western blot 检测心肌 梗死边缘区 VEGF、bFGF、p-MEK、p-ERK 的蛋白表达水平；荧光定量 PCR 检测心肌梗死边缘区 VEGF、bFGF、p-MEK、p-ERK 的 mRNA 表达水平。 结果： 1.对心肌梗死大鼠血管新生组织形态的影响 HE 染色显示，模型组心 肌细胞广泛水肿，梗死灶可见心肌纤维溶解，纤维组织增生、炎性细胞灶 性浸润，组织局部坏死。葱白组、黄芪组表现为心肌细胞坏死较模型组少 见，炎细胞浸润，纤维组织增生少见。通阳益气组、麝香保心丸组大多数 心肌细胞无异常，可见炎性细胞浸润，无明显纤维增生。假手术组心肌细 胞未见明显异常，无纤维组织增生及炎细胞浸润。CD34 染色后检测心肌 梗死边缘区微血管数量（MVC）和微血管密度（MVD）显示，与假手术组比 较，模型组大鼠 MVD 值明显升高（p＜0.01）；与模型组比较，通阳益气 组、葱白组、黄芪组、麝香保心丸组 MVD 数值明显升高(p＜0.01)；与麝 香保心丸组比较，通阳益气组 MVD 数值无统计学差异（p＞0.05）；与通 阳益气组比较，葱白组、黄芪组 MVD 数值均明显降低（p＜0.01）。 II II 2.心肌梗死大鼠血清 IL-6、TGF-β的含量 与模型组比较，通阳益气 组、葱白组、麝香保心丸组 IL-6 水平均明显降低(p＜0.01)，黄芪组 IL-6 水平亦降低(p＜0.05)；与麝香保心丸组比较，通阳益气组、葱白组 IL-6 水平降低(p＜0.05)；而通阳益气组与葱白组相比较，IL-6 水平无统计学 差异（p＞0.05)。 与模型组比较，葱白组 TGF-β水平明显升高(p＜0.01)，通阳益气组、 麝香保心丸组 TGF-β水平亦升高(p＜0.05)；而通阳益气组与麝香保心丸 组、葱白组分别进行比较，TGF-β水平无统计学差异（p＞0.05)。 3.对大鼠缺血心肌 VEGF、