辛伐他汀对人牙髓细胞的体外作用及机制分析-effect and mechanism of simvastatin on human dental pulp cells in vitro.docxVIP

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辛伐他汀对人牙髓细胞的体外作用及机制分析-effect and mechanism of simvastatin on human dental pulp cells in vitro

PAGE PAGE 10 辛伐他汀对人牙髓细胞的体外作用及机制研究 中文摘要 目的: 探讨辛伐他汀对人牙髓细胞的体外作用及机制 方法: 1. 采用改良组织块法,体外培养人牙髓细胞,并用不同级别浓度的辛伐他汀 干预健康人牙髓细胞,选择对健康人牙髓细胞增殖最显著的辛伐他汀浓度来进一 步细化研究; 2. 特定级别浓度辛伐他汀干预健康人牙髓细胞及脂多糖诱导的人牙髓细胞, 选择对健康人牙髓细胞及模拟炎症状态下的脂多糖诱导的人牙髓细胞效果最佳 的浓度; 3. 观察不同时间点辛伐他汀作用下的健康人牙髓细胞和炎性人牙髓细胞的 血管内皮生长因子分子水平及蛋白水平表达的变化; 4. 观察不同时间点辛伐他汀干预下的健康人牙髓细胞和炎性人牙髓细胞的 骨形成蛋白-2 mRNA 表达变化,及碱性磷酸酶染色情况。 结果: 1. 10-2μmol/mL 辛伐他汀促进健康人牙髓细胞增殖,高浓度 1μmol/mL 则抑 制健康人牙髓细胞增殖; 2. 进一步细分同一级别的辛伐他汀浓度范围(0.5×10-2、10-2、1.5×10-2、 5×10-2μmol/mL)作用于健康人牙髓细胞及炎性人牙髓细胞,10-2μmol/mL 辛伐 他汀促进健康人牙髓细胞增殖,而抑制炎性人牙髓细胞增殖; 3. 干预的 5、7 天后,辛伐他汀能明显促进健康人牙髓细胞分泌血管内皮生 长因子,脂多糖在干预的 3、5 天后也能明显促进健康人牙髓细胞分泌血管内皮 生长因子,辛伐他汀则抑制炎性人牙髓细胞分泌和表达血管内皮生长因子; 4. 辛伐他汀和脂多糖均促进健康人牙髓细胞骨形成蛋白-2 mRNA 的表达, 辛伐他汀也促进炎性人牙髓细胞表达骨形成蛋白-2 mRNA; 5.碱性磷酸酶染色深浅依次为:辛伐他汀干预的健康人牙髓细胞组、健康人 牙髓细胞组、炎性人牙髓细胞组、辛伐他汀干预的炎性人牙髓细胞组。 结论: 1. 10-2μmol/mL 辛伐他汀促进健康人牙髓细胞增殖,而抑制炎性人牙髓细胞 增殖; 2.适宜浓度的辛伐他汀能促进健康人牙髓细胞分泌及表达血管内皮生长因 子,但抑制炎性人牙髓细胞分泌及表达血管内皮生长因子; 3.适宜浓度的辛伐他汀促进健康人牙髓细胞表达骨形成蛋白-2 mRNA,并 提高碱性磷酸酶活性; 4.适宜浓度的辛伐他汀促进炎性人牙髓细胞表达骨形成蛋白-2 mRNA,但 抑制碱性磷酸酶活性。 关键词:辛伐他汀 人牙髓细胞 增殖 血管内皮生长因子 骨形成发生蛋白-2 碱 性磷酸酶 The effects and mechanisms of simvastatin on human dental pulp cells in vitro ABSTRACT Objective: To investigate the effects and mechanisms of simvastatin on human dental pulp cells(hDPCs) in vitro. Methods: hDPCs were cultured according to the method of modified tissue culture.Then different concentrations of simvastatin were added into each group of hDPCs until the ultimately concentrations were 10-2,10-2,10-1and1μmol/mL respectively while the group without simvastatin as control group. The suitable concentration was determined and further to subdivided. The former concentrations of simvastatin,which were 0.5×10-2,10-2,1.5×10-2 and 5×10-2μmol/mL,were further subdivided to add into the hDPCs and lipopoly- saccharides (LPS)-induced hDPCs.The optimal suitable simvastatin concentration was found out. After simvastatin irradiation,the changes of vascular endothelial growth factor (VEGF) were examined in the level of genes and proteins. The expression of

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