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AM真菌对滇重楼光合参数及生理指标影响 　　[摘要]通过室温盆栽接种试验与室内分析相结合的方法，观察灭菌土壤条件下接种28种丛枝菌根（AM）真菌对滇重楼光合参数和生理生化指标的影响。结果表明，滇重楼与AM真菌形成了良好的共生关系。AM真菌诱导处理后，不同AM真菌对滇重楼叶片的光合参数和生理生化指标的影响有所差异，AM真菌的施用能够提高滇重楼叶肉细胞的光合作用强度，提高滇重楼叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量及保护酶活性，增强了滇重楼抗不利环境的能力，促进了滇重楼的生长，而滇重楼与AM真菌之间存在一定的相互选择性。从综合接种效应来看，瑚状盾巨囊霉Racocetracoralloidea、美丽盾巨孢囊霉Scutellosporacalospora、近明球囊霉Claroideoglomusclaroideum、透明盾巨孢囊霉S.pellucida和明球囊霉Rhizophagusclarus是最适宜滇重楼大田栽培时推广应用的优良备选菌株。 　　[关键词]滇重楼；AM真菌；光合特性；生理生化指标；抗逆性 　　滇重楼Parispolyphyllavar.yunnanensis（Franch.）Hand.Mazz为多年生草本植物，药用根茎[1]。具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊等功效[2]。近年来，重楼需求量大，野生资源蕴藏量难以满足市场需求，栽培滇重楼已成为人们关注的焦点，由于管理粗放、肥料与农药使用不当，导致栽培滇重楼入药质量不稳定[34]。因此，利用生物技术提高滇重楼产量和质量已成为今后滇重楼规范化栽培体系研究的重点内容。 　　丛枝菌根（arbuscularmycorrhiza，AM）真菌是一类广泛分布于陆地生态系统中的土壤有益微生物，能与绝大部分植物根系形成互惠共生体[5]。AM真菌能改善植物养分吸收、植株生长状况、提高植物的产量和品质等。例如，黄京华等[6]观察到接种AM真菌的黄花蒿Artemisiaannua生物量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率及叶绿素含量都显著高于未接种的对照株；陈丹明等[7]认为接种AM真菌有助于提高牡丹Camptothecaacuminata叶片的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白。前期研究表明，人工栽培条件下滇重楼光合能力有限，对滇重楼产量和品质有较大影响[89]。滇重楼能形成典型重楼型菌根，且对AM真菌有不同程度的菌根依赖性，AM真菌能部分提高滇重楼根茎中甾体皂苷的含量[1013]。而AM真菌对滇重楼生长的影响尚未报道。为此，本试验在室温盆栽条件下，研究了接种不同AM真菌对滇重楼生长、光合特性及生理生化指标的影响，以便充分利用AM真菌资源提高滇重楼产量和品质提供依据。 　　1材料和方法 　　1.1供试材料与培养本试验所用AM真菌通过美国国际丛枝菌根真菌种质资源保藏中心（INVAM）购得相应AM真菌纯净菌剂，接种菌剂为带有孢子、菌丝及侵染后根段的栽培基质，见表1。 　　滇重楼新鲜根茎选自云南省大理州农业科学推广研究院种植基地大小基本一致的样品，经大理学院药学与化学学院生药学教研室周浓副教授鉴定为百合科植物滇重楼P.polyphyllavar.yunnanensis。 　　栽培基质为重庆三峡学院百安校区的菜园土与河沙的混合物（体积比3∶1，过2mm筛，121℃高压灭菌锅内灭菌2h）。采用室温盆栽方法，设AM（接种28种AM真菌）组和CK（对照）组共29种处理。每处理2个重复，每重复3盆，每盆栽种滇重楼15 　　株。将栽培袋用10%次氯酸钠溶液消毒15min后，并用流水清洗干净。 　　2013年2月24日，选择大小一致的滇重楼根茎，菌土均匀层施于表土下滇重楼根茎部，接种剂量为每盆15mL（接种菌剂为带有孢子、菌丝及侵染后根段的栽培基质混合样品，每1mL约含60个孢子）。接种后室温（自然光照）中培养。生长期间按常规管理，定期浇Hoagland营养液。 　　1.2AM真菌侵染率随机选取滇重楼根系30条，剪成长约1.0cm的根段，采用曲利本蓝染色法进行AM真菌的侵染率测定[14]。 　　1.3叶片光合色素含量的测定摘取测定气体交换的叶片，按照张志良等[15]的方法测定。 　　1.4气体交换参数的测定选择晴朗少云的天气，于9：00―11：30气孔张开度最大时，采用德国WALZ公司生产的GFS3000便携式光合作用仪直接测定叶片气体交换参数。测定时采用红蓝光光源，设定光强PAR为800μmol?m-2?s-1/sup（约为自然光强），使用开放式气路，空气流速为0.5L?min-1，叶温25℃，相对湿度为50%～70%，外界CO2浓度[Ca，（450±6）μmol?mol-1]，每一处理重复测定3次。测定参数包括重楼叶片净光合速率（Pn，μmol?m-2?s）、蒸腾速率（Tr，mmol?m-2?s-1）